Über TRIS-Puffer und TRIS-abgeleitete Puffer
Pufferlösung ist normalerweise eine Lösung, die aus schwacher Säure und seine schwachen Basis der Base- oder und seine verbundene Säure besteht, die pH ändern können, wenn ein bestimmter Betrag anderer Substanzen addiert werden. Die Funktion des Puffers ist, den pH der Lösung innerhalb eines begrenzten Bereiches zu justieren, damit die Säure der geprüft zu werden Lösung an die spezifizierte Strecke durch die Analyse sich anpaßt. In den biochemischen Experimenten und in Verbindung stehender Forschungsarbeit wird eine große Menge des Puffers angefordert, den pH des Prüfungssystems beizubehalten. Unter ihnen sind TRIS und seine abgeleiteten Puffer auf organischer Synthese, Beschichtungen, feuerfesten Materialien und den biochemischen und pharmazeutischen Gebieten weitverbreitet. So sind was die Vorteile und die Nachteile in den praktischen Anwendungen?
Was ist TRIS-Puffer?
Tris, alias Tris (Hydroxymethyl-) Aminomethane, Tris-Puffer ist, besonders in der Nukleinsäure weitverbreitet und die Forschungsexperimente, die auf DNA bezogen werden, hat sie viel mehr Vorteile als PBS-Phosphatpuffer. Tris ist auch ein wichtiger Rohstoff für die Synthese eines anderen biologischen Puffers, TAPS.The-Vorteile von Tris liegen sehr auf der Hand. Die pH-Strecke tris Puffers ist 7-9, und die Alkalinität ist stark. Unter Verwendung dieses eines Puffers pH-Puffer konfigurieren kann das Reichen von Säure zu Alkali. Gleichzeitig weil es nicht mit Metallen herbeiführt, und mit wenig Störung mit biochemischen Prozessen, tris Puffer ist als Lösungsmittel für Nukleinsäuren und Proteine nicht nur weitverbreitet, aber hat auch viel anderen wichtigen Gebrauch. Mit niedriger Ionenstärke von Tris-Puffer, kann es für die Bildung von Zwischenfasern von lamin in C.-elegans verwendet werden. Tris ist auch eine der Hauptkomponenten des Proteinelektrophoresepuffers. Es bildet ein Puffersystem mit Glycin im Elektrophoresepuffer, um den pH während der Elektrophorese zu stabilisieren.
Es gibt Nachteile von TRIS-Puffer muss gemerkt werden:
Zuerst wird der pH von TRIS-Puffer groß durch Konzentration beeinflußt;
Zweitens wird der Effekt von TRIS-Puffer durch Temperatur geändert, zum Beispiel bei Zimmertemperatur von 25°C, ist der pH von TRIS-Puffer 7,8, aber 8,4, wenn er bei 4 °C und 7,4 an 37°C. erreicht hat. Deshalb wenn der Puffer an 4°C eingesetzt wird, aber die Testtemperatur an 37°C, ist die Ergebnisse seiner Wasserstoffionenkonzentration sind Zunahme zehnfach.
Schließlich ist die Dämpfungsfähigkeit arm, wenn der pH niedriger als 7,5 ist.
Einige normale TRIS-abgeleitete Puffer
TBS-Puffer wird hauptsächlich aus Tris, Natriumchlorid, BSA, Konservierungsmitteln, usw. verfasst. Der pH von TBS-Puffer ist 7,4. Es ist eine isotonische abgedämpfte Salzlösung, die in der Biologie, wie Experimenten im Immunohistochemistry, situ Hybridation, Enzym-verbundene Immunosorbentprobe allgemein verwendet ist. Und unspezifisch verklemmte Antikörper in der Westfleckprüfung waschend.
TBS-Puffer ist ein Salzpuffer, der durch isotonische Salzlösung und TRIS-HCL Puffer gemacht wird, hauptsächlich bestanden aus TRIS-HCL, NaCl, tween20. Die passende pH-Strecke ist 7.2-7.5.
TE-Puffer ist eine Art Elektrophoresepuffer, vorbereitet durch TRIS und EDTA. Der pH ist 8,0. Er wird hauptsächlich verwendet, um Nukleinsäure und Speicher DNA und RNS stabil aufzulösen.
TAE-Puffer ist ein Puffer, der aus Tris, Essigsäure und EDTA besteht. Die pH-Strecke ist 7.2-8.4. Es ist ein Puffer, der für kurzfristige Elektrophorese von großen Fragmenten von DNA weitverbreitet ist.
TBE-Puffer ist eine Lösung, die aus Tris-Basis, Borsäure und EDTA (ethylenediaminetetraacetic Säure) besteht. TBE-Puffer wird allgemein in der Agarosegelelektrophorese angewendet, um DNA-Produkte zu analysieren, resultierend aus PCR-Verstärkungs-, DNA-Reinigungsprotokollen oder DNA-Klonen.
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