CAS 521-31-3 Luminol in Protein WB experimentieren Luminol-Lumineszenz-Reaktion

DieChemilumineszenzreagenziumLuminol, der vollständige Name von 3-aminophthalem Hydrazid und die allgemeine Bezeichnung von Luminol,wird üblicherweise für enzymatische Chemilumineszenzexperimente und den Nachweis von Spuren von Blutflecken in Strafverfolgungsverfahren verwendetAufgrund seiner einfachen Struktur, seiner einfachen Synthese und seiner hohen Leuchtquantenwirksamkeit wird es nun auch in der westlichen Blotting-Technik verwendet.

Grundlegende Informationen

LuminolReagenz

Western blotting is the transfer of protein samples separated by PAGE (polyacrylamide gel electrophoresis) to a solid carrier NC membrane (nitrocellulose membrane) or PVDF membrane (polyvinylidene fluoride membrane)Die nicht kovalente Bindungsform adsorbiert Proteine und kann die durch Elektrophorese getrennten Peptidtypen und ihre biologischen Aktivitäten unverändert halten.Verwenden Sie das Protein oder Polypeptid auf dem festen Träger als Antigen zur Reaktion mit dem entsprechenden Antikörper, und reagiert dann mit dem Enzym oder dem isotopmarkierten zweiten Antikörper,und dann Farbentwicklung oder Autoradiographie unterziehen, um den spezifischen Zweck der elektroforetischen Trennung zu erkennenDiese Technik wird auch zur Erkennung der Expression von Proteinspiegeln eingesetzt.

Die Luminol-Lumineszenzreaktion ist der letzte Schritt im Western-Blot-Experiment, bei dem das gesamte Protein mit der Lösung A und der Lösung B versehen wird.und man kann Farbe oder Lumineszenz entwickeln, um die experimentellen Ergebnisse zu beobachtenDie häufig verwendeten Leuchtmittel A und B sind Luminol bzw. Wasserstoffperoxid.

Da die Reaktion von Luminol, das durch Wasserstoffperoxid katalysiert wird, um zu oxidieren und Licht zu emittieren, die Beteiligung von Peroxidase erfordert,Es gehört zur enzymatischen Chemilumineszenz und muss den pH-Wert der Reaktion aufrechterhalten.Die Homogenisierung Puffer im Experiment ist in der Regel aus unserem Tris-HCL TBS Puffer, Protein Transfer Puffer auch Tris plus SDS, Glycin, Methanol Puffer-System verwenden,wenn es mehr als 20kd Protein enthält, können Sie CAPS-Puffer verwenden und statt Glycin Tricine verwenden.

Produktverpackung

Luminol wird in der Regel zu einer gebrauchsfertigen ECL-Lumineszenzflüssigkeit auf dem Markt hergestellt.LuminolDas von Desheng hergestellte Pulverreagenz ist lichtempfindlich und ist daher besser für die Lagerung geeignet.und verschiedene Konzentrationen können nach verschiedenen Experimenten konfiguriert werdenEs ist nicht notwendig, mehrere Reagenzkonzentrationen zu kaufen, um Abfälle zu reduzieren.