CAS 521-31-3 Luminol in Protein WB experimentieren Luminol-Lumineszenz-Reaktion

Anwendung von Luminol CAS521-31-3 in Protein WB experimentieren Luminol-Lumineszenz-Reaktion

Das Chemolumineszenzreagens luminol, der vollständige Name aminophthalic Hydrazids 3 und der allgemeine Name von luminol, wird normalerweise für enzymatische Chemolumineszenzexperimente und Entdeckung von Spurnblutflecken in den Verbrechensermittlungen verwendet. Wegen seiner einfachen Struktur einfache Synthese und hohe leuchtende Quantenausbeute, wird sie jetzt auch im Westfleck für das Westbeflecken verwendet.

Basisdaten

Das Westbeflecken ist die Übertragung von den Proteinproben, die durch SEITE getrennt werden (Polyacrylamidgelelektrophorese) auf eine feste Fördermaschine NC-Membran (Nitrozellulosemembran) oder PVDF-Membran (Polyvinylidenfluoridmembran). Die nicht-kovalente Bondform adsorbiert Proteine und kann die Arten von den Peptiden halten, die unverändert durch Elektrophorese und ihre biologischen Aktivitäten getrennt werden. Benutzen Sie das Protein oder das Polypeptid auf der festen Fördermaschine als das Antigen, um mit dem entsprechenden Antikörper zu reagieren, und reagieren Sie dann mit dem Enzym oder dem Isotop-beschrifteten zweiten Antikörper, und machen Sie dann Farbentwicklung oder -autoradiographie durch, um den spezifischen Zweck der elektrophoretischen Trennung zu ermitteln die Proteinkomponente der Genexpression. Diese Technik ist auch weitverbreitet, den Ausdruck von Proteinniveaus zu ermitteln.

Luminol-Lumineszenzreaktion

Luminols Lumineszenzreaktion ist der letzte Schritt im befleckenden Experiment des Westflecks des gesamten Proteins. Addieren Sie 1:1lösung A und Lösung B, um den pvdf Film zu bedecken, und Sie können Farbe oder Lumineszenz entwickeln, um die Versuchsergebnisse zu beobachten. Die allgemein verwendeten Lumineszenzflüssigkeiten A und B sind luminol und Wasserstoffperoxid, beziehungsweise.

Da die Reaktion von luminol katalysiert durch Wasserstoffperoxid, um Licht zu oxidieren und auszustrahlen die Teilnahme der Peroxydase erfordert, gehört sie enzymatischer Chemolumineszenz und Bedarf, das pH der Reaktion instandzuhalten. Der Homogenisationspuffer im Experiment wird normalerweise von unserem Puffer Tris-HCL TBS, Proteinübergangspuffer verwenden auch Tris plus SDS, Glycin, Methanolpuffersystem, wenn er höher als Protein 20kd ist, Sie kann CAPS benutzen abzudämpfen und verwendet Tricine anstelle des Glycins gemacht.

Luminol wird normalerweise in gebrauchsfertige Ausführungssteuersprachenlumineszenzflüssigkeit auf dem Markt gemacht. Luminol produzierte durch Desheng ist ein Pulverreagens. Weil das Lumineszenzreagens für Licht und Temperatur empfindlich ist, ist das Pulverreagens zur Lagerung förderlicher. Es kann verwendet werden und verschiedene Konzentrationen können entsprechend verschiedenen Experimenten konfiguriert sein. Es gibt keinen Bedarf, mehrfache Konzentrationen von Reagenzien zu kaufen, um Abfall zu verringern.