Anwendung von CAPS (CAS 1135-40-6) im Protein Transmembrane-Experiment

Einleitung

CAPS, 3 (Cyclohexylamin) - 1-propanesulfonic Säure, eine organische Chemikalie, weißes kristallines Pulver, CAS1135-40-6, ist ein biologischer Puffer, ein allgemein verwendet in den biochemischen Diagnoseausrüstungs-, DNA-/RNAextraktionsausrüstungen und IN PCR-Diagnosenausrüstungen. Puffer für Enzymchemie und HPLC-Trennung von grundlegenden Drogen ist im Membranübergangsprozeß des Proteusder reihe nach ordnens weit verbreitet. CAPS dämpfen wird verfasst aus CAPS, entionisiertem Wasser, etc. ab, und sein pH wird bis 11,0 auf purificationof fibronectin eingestellt.

CAPS dämpfen ab

Springende Punkte der Operation

1. SDS-PAGE Elektrophorese: entsprechend den herkömmlichen Bedingungen (CAPS-System: für > = Protein 20kD; System Tris Tricine: für Protein mit niedrigem Molekulargewicht auch für Protein des hohen Molekulargewichts);

2. Methanolkonzentration: die Strecke der Methanolkonzentration in electroimprinting Puffer CAPSs ist 0-20% (Methanolkonzentration ist hoch, verwendet für Proteinübertragung mit niedrigem Molekulargewicht; Methanolkonzentration ist niedrig oder sogar enthält nicht das Methanol, benutzt für Proteinübertragung des hohen Molekulargewichts);

Behandlung der Membran 3.PVDF: nehmen Sie die PVDF-Membran heraus, tränken Sie sie im Methanol für einige Sekunden, und setzen Sie sie dann in den electroblotting Puffer CAPSs. (Anmerkung: die PVDF-Membran wird an der Verlandung nach Operation verhindert. Wenn die Membran trocken ist, wiederholen Sie den Vorgang dieses Schrittes);

4. Gelbehandlung: entfernen Sie Gelgel und tränken Sie in CAPS-Puffer für 5-10 Minuten. (Anmerkung: dieser Schritt kann ausgelassen werden, wenn man etwas starke grundlegende Proteine PU > 9,0 überträgt);

5. Installieren Sie den Übergangsschlitz: tauchen Sie das Filterpapier und den Schwamm im befleckenden Elektropuffer unter, dann drücken Sie das elektrische Prägungssandwich im Auftrag des Schwammes, des Filterpapiers, DES PVDF-Filmes, des Gels, des Filterpapiers und des Schwammes, und setzen Sie es in einen kleinen elektrischen Drehschlitz.

6. Übergangszustände: Übertragung mit konstantem Druck 50V (100-170 MA) bei Zimmertemperatur für 0.5-2h. (Anmerkung: lassen Sie die Blasen zwischen dem Gel und PVDF-Film ab. Zum Beispiel sollte das Protein über 70 KD für längere Zeit übertragen werden);

7. Vorbehandlung des PVDF-Membranfärbens: nehmen Sie PVDF-Membran heraus und spülen Sie sie mit entionisiertem Wasser aus, tränken Sie sie im Methanol für einige Sekunden, dann färben Sie sie;

8. Membranfärben: Färbendes Coomassie-Brillantblau (lösen Sie 0,1% Coomassie-Brillantblau R-250 in 40% methanol/1% Essigsäure) auf, für 30-50 Sekunden (nicht mehr als 1 Minute), entfärbend mit 50% Methanol (entfärbende Lösung der Änderung häufig), völlig waschen mit entionisiertem Wasser, und dann trocknen;

CAPSbuffer- Vorbereitung

1. 10×CAPS (100mmol/L) wird Pufferlösung vorbereitet, wie folgt: CAPS, 22.13g; fügen Sie entionisiertes Wasser 900ml hinzu; justieren Sie das pH bis 11,0 mit NaOH 2mol/L (über 20ml), dann verdünnen Sie zu 1L und speichern Sie an 4℃.

2. Electroimprinting Puffer CAPSs (1×CAPS, das 10% Methanol enthält) wird durch die folgenden Methoden vorbereitet: 200ml von 10 × CAPS; 200ml des Methanols; 1600ml des entionisierten Wassers.

Andere Anwendungen

CAPS wird auch benutzt, um Zusatzwerkstoffe, Klimagerät und Rohstoffe für die Herstellung herzustellen; es wird auch verwendet, um Pyrotechnik herzustellen; es wird als analytisches Reagens, Wärmeaustauschfördermaschine verwendet und verwendet auch in der Pharmaindustrie; es wird für Klimaanlage, Pyrotechnik, Trockenbatterien verwendet; es wird auch als Fluss und Trockenmittel verwendet; es wird für Härtemittel des wässrigen Isozyanats in der Farbenindustrie verwendet. Desheng-Firma spezialisiert sich auf R&D und Produktion von verschiedenen biologischen Puffern, einschließlich CAPS, Tris, Bicine, MOPS, etc., mit hoher Reinheitsgrad ≥ 99%, stabilem Prozess, willkommenen Unternehmen und Einzelpersonen zur weiteren Beratung.