Eine neue Option für die Kapillaren Elektrophoreze: Wie der TAPS-Puffer 29915-38-6 die Nukleinsäureseparation optimiert

Das Funktionsprinzip der Kapillarzonen-Elektrophorese

Die Kapillarzonen-Elektrophorese ist eine hocheffiziente Trenn- und Analysetechnik. Diese Methode verwendet ein elastisches Quarzglaskapillarrohr mit einem Innendurchmesser von typischerweise 50 bis 75 Mikrometern als Trennkanal und nutzt ein Hochspannungs-Gleichstrom-Elektronenfeld, um die Probenmigration anzutreiben. Ihr Trennungsprinzip beruht auf den Unterschieden in der Mobilität und dem Verteilungsverhalten zwischen verschiedenen Komponenten, wodurch eine präzise Trennung ohne die Notwendigkeit traditioneller Gelmedien ermöglicht wird.

Im Inneren der Quarzglaskapillare trägt die Oberflächenwand, wenn der pH-Wert der Pufferlösung höher als 3 ist, eine negative Ladung und bildet bei Kontakt mit der Lösung eine Doppelschicht. Nach Anlegen eines Hochspannungselektronenfeldes treibt die Kationenschicht in der Doppelschicht die gesamte Pufferlösung in Richtung der negativen Elektrode, was als Elektroosmose bezeichnet wird. Gleichzeitig wandern geladene Partikel unter der Einwirkung eines elektrischen Feldes in Richtung der entgegengesetzten Elektrode und bilden eine elektrophoretische Bewegung. Die tatsächliche Migrationsgeschwindigkeit der Partikel wird sowohl durch Elektrophorese als auch durch Elektroosmose bestimmt, und jede Komponente wird aufgrund von Unterschieden in Ladung, Masse, Volumen und Form effektiv getrennt.

TAPS-Puffer

Vorteile des TAPS-Puffers in der Nukleinsäure-Elektrophorese

Der TAPS-Puffer hat sich in Nukleinsäureexperimenten, insbesondere für die Kapillarzonen-Elektrophorese-Analyse von DNA und RNA, als gut geeignet erwiesen. Sein stabiler pH-Bereich und seine Pufferkapazität tragen dazu bei, konstante Trennbedingungen während der Elektrophorese aufrechtzuerhalten und somit die Reproduzierbarkeit der Ergebnisse zu verbessern. Für geladene Biomoleküle der Nukleinsäure kann das TAPS-Puffersystem eine geeignete leitfähige Umgebung bieten und die Trenneffizienz optimieren.

Im Elektrophoresepuffer kann zusätzlich zum TAPS-Puffer je nach Trennanforderungen eine geeignete Menge an organischem Lösungsmittel oder Tensid zur Modifizierung zugesetzt werden. Diese Zusatzstoffe können die Trennselektivität weiter regulieren und die Peakform verbessern. Es ist zu beachten, dass alle Laufpuffer vor der Verwendung entgast werden sollten, um Blasen zu eliminieren, die die Trennung beeinträchtigen könnten.

Technologischer Fortschritt der Kapillarelektrophorese

Im Gegensatz zur traditionellen Gelelektrophorese ist die Kapillarzonen-Elektrophorese nicht auf Agarose- oder Polyacrylamidgel als Trennmedium angewiesen. Diese Eigenschaft vereinfacht den experimentellen Prozess und ermöglicht eine schnelle und effiziente Online-Detektion. Die Kapillarelektrophorese-Technologie kann auch mit chromatographischen Prinzipien kombiniert werden, z. B. durch Füllen des Rohrs mit einer stationären Phase oder Beschichten der Rohrwand mit einer stationären Phase, um einen kapillarelektrochromatographischen Modus zu bilden, der den dualen Trennmechanismus von Elektrophorese und Flüssigkeitschromatographie kombiniert und so seinen Anwendungsbereich erweitert.

Um die Wandadsorption zu reduzieren und die Stärke des elektroosmotischen Flusses zu kontrollieren, wird die Innenwand des Kapillarrohrs oft beschichtet. Diese Modifikationstechnik kann die Trennleistung erheblich verbessern, insbesondere für die Analyse von Biomolekülen wie Proteinen und Nukleinsäuren. Die Kapillarlänge liegt in der Regel zwischen 30 und 100 Zentimetern, was die Trenneffizienz und die Analysegeschwindigkeit ausgleicht.

Wichtige Punkte der experimentellen Durchführung

Vor der Durchführung der Kapillarelektrophorese ist sicherzustellen, dass das Rohr vollständig mit dem Puffersystem gefüllt ist. Eine gute Pufferfüllung erhält nicht nur die stabile Leitung des elektrischen Feldes aufrecht, sondern hilft auch bei der Fokussierung und Trennung der Probe. Quarzglas-Kapillare ist aufgrund ihrer hervorragenden elektrischen Isolierung und optischen Transparenz zum Standardmaterial für diese Technologie geworden.

TAPS-Puffer wird in Pulverform zur präzisen Herstellung von Pufferlösungen unterschiedlicher Konzentrationen bereitgestellt. Seine chemischen Eigenschaften können mit mehreren Nachweismethoden kompatibel sein, einschließlich UV-Absorption und Fluoreszenzdetektion, und bieten zuverlässige Unterstützung für die Nukleinsäurequantifizierung und -qualitative Analyse. Im Bereich der Nukleinsäure-Trennung ist die Auswahl eines geeigneten Puffersystems ein wichtiger Schritt zur Erzielung hochauflösender Ergebnisse, und die Anwendung von TAPS bietet Forschern eine effektive Wahl.

Die Kapillarzonen-Elektrophorese-Technologie wurde aufgrund ihrer effizienten und schnellen Trenneigenschaften im Bereich der Biowissenschaften weit verbreitet. Der TAPS-Puffer stellt als Schlüsselreagenz in dieser Technologie eine stabile und zuverlässige Pufferumgebung für die Nukleinsäure-Trennung bereit. Mit der kontinuierlichen Weiterentwicklung der Technologie wird die Optimierung der Pufferzusammensetzung und der Kapillar Modifikationsmethoden ihr Potenzial in der Analyse komplexer biologischer Proben weiter ausbauen und mehr Wert für die wissenschaftliche Forschung und die diagnostischen Bereiche schaffen.Produktverpackung

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