Die Rolle von Trihydroxymethylaminomethan 77-86-1 in Western-Blot-Experimenten

Western blot ist eine klassische Technik in der Molekularbiologie zum Nachweis spezifischer Proteine, die mehrere Schritte wie Probenverarbeitung, elektroforetische Trennung, Transferdruck,und Antikörperdetektion.Trihydroxymethylaminomethan, als Kernpuffermittel, bietet eine kritische Unterstützung für die Genauigkeit und Reproduzierbarkeit von Experimenten durch die Aufrechterhaltung einer stabilen pH-Umgebung, die Optimierung der Ionenfestigkeit,und Schutz der Proteinaktivität.

1,Stabile pH-Welt, Schutz der Proteinstruktur

Die Ladungsverteilung, Löslichkeit und Antigen-Epitop-Exposition von Proteinen hängen stark vom pH-Wert ab.0) ist sehr gut mit den im westlichen Blot-Experiment üblichen Bedingungen kompatibel., und kann pH-Fluctuationen, die durch das Zusatz von chemischen Reagenzien oder elektrochemischen Reaktionen während des Versuchsprozesses verursacht werden, wirksam widerstehen.

Trihydroxy-Methylaminomethan-Pulver für die Aufrechterhaltung

Während der Probenlysestadium hält der Trihydroxymethylaminomethan enthaltende Lysespupper eine neutrale bis schwach alkalische Umgebung, hemmt die endogene Proteaseaktivität,und verhindert den Abbau des ZielproteinsBei der Herstellung des SDS-PAGE-Gels bilden Trimethylolaminomethan, Acrylamid, Ammoniumpersulfat und andere Bestandteile gemeinsam ein stabiles Polymerisationssystem.mit einer pH-Stabilität, die dafür sorgt, dass der Porendurchmesser des Gels gleichmäßig ist, und vermeidet die Ausfällung oder Konformationsänderung von Proteinen durch lokale Säuregewinnung.das Trihydroxymethylaminomethan im Transferpuffer neutralisiert die Oberflächenladung der Membran, reduziert die unspezifische Bindung zwischen dem Protein und der Membran und schützt die Proteinantigenität weiter.

2,Optimierung des Elektrophorese-Systems für eine präzise Trennung

Das Konzentrationsdesign von Trihydroxymethylaminomethan wurde optimiert: Eine zu niedrige Konzentration kann zu einer unzureichenden Leitfähigkeit und instabilen Strom führen.Es kann zu Gel-Erwärmung oder Banddiffusion führen.Seine moderate Ionenfestigkeit kann nicht nur die Effizienz der Elektrophorese gewährleisten, sondern auch die Stabilität der Gelporengröße aufrechterhalten.so dass verschiedene Molekulargewichtsproteine klar getrennt werden können.

3,Förderung der Effizienz des Transfers und Gewährleistung der vollständigen Migration von Proteinen

Aufrechterhaltung des Ionenhaushalts: Tris (Hydroxymethyl) Aminomethan, Glycin und Methanol bilden zusammen eine Transferdrucklösung.3) stellt sicher, dass das Protein während des Transferdrucks seine natürliche Konformation beibehält, Vermeidung von Denaturierung oder Niederschlag.

Optimierung des elektrischen Feldantriebs: Das Trihydroxymethyl-Aminomethanglycin-System bildet einen stabilen elektrischen Feldgradienten und treibt Proteine zu einer konstanten Rate zur Membran zu.Methanol kann die Gelnetzstruktur zerstören, während Trimethylolaminomethan die Ionenfestigkeit durch Pufferung ausgleichen kann und die übermäßige Ansammlung von Membranoberflächenladungen verhindert,und verbessern so die Transferwirksamkeit von Proteinen mit großem Molekülgewicht.

Schutzmembranprotein: Die milden chemischen Eigenschaften von Trihydroxymethylaminomethan verhindern, dass das Membranprotein durch starke Säuren oder Basen beschädigt wird.Sicherstellung der vollständigen Exposition von Antigen-Epitopen, wodurch die Empfindlichkeit und Genauigkeit der Antikörperbindung erhöht werden.

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