Die Wirkungsweise des biologischen Puffers MES 4432-31-9 im PCR-Kit

In molekularen Biologie-Experimenten ist die PCR-Technologie (Polymerase-Kettenreaktion) aufgrund ihrer Fähigkeit, spezifische DNA-Fragmente effizient zu verstärken, zu einem Kernwerkzeug geworden.PCR-Reaktionen sind äußerst empfindlich auf Umweltbedingungen, insbesondere geringe pH-Schwankungen, die sich direkt auf die Aktivität der DNA-Polymerase, die Bindungswirksamkeit von Primern und Vorlagen auswirken und sogar zu einer unspezifischen Amplifikation führen können.Unter den vielen "Helden hinter den Kulissen", die die Stabilität der Reaktionssysteme erhalten, 2- (N-Morpholin) -Ethansulfonsäure (MES-Puffer), hat sich aufgrund seiner einzigartigen chemischen Eigenschaften als wirksamer biologischer Puffer zu einem unverzichtbaren "unsichtbaren Hüter" in PCR-Kits entwickelt.

1,pH-Wert genau regulieren

Jeder Schritt der PCR-Reaktion - Denaturierung, Glühen und Verlängerung - beruht auf der genauen Katalyse der DNA-Polymerase, und die Aktivität des Enzyms hängt stark von der pH-Umgebung ab.Der pKa-Wert von MES beträgt, wodurch es unter schwach sauren Bedingungen eine ausgezeichnete Pufferfähigkeit aufweist. MES effectively resists pH fluctuations caused by temperature changes (such as acidic substance release during high-temperature denaturation) or reagent addition during the reaction process by dynamically balancing protonation and deprotonationDiese "Pufferbegleitung" sorgt dafür, dass das Enzym in jedem Zyklus eine effiziente katalytische Aktivität aufrechterhält.Vermeidung einer Verringerung der Verstärkungseffizienz oder unreiner Produkte durch pH-Ungleichgewicht.

MES Pulver

2,Vereinbarkeitsvorteil

Im Vergleich zu anderen Puffermitteln verleiht die molekulare Struktur von MES einen einzigartigen Kompatibilitätsvorteil.aber auch das Risiko einer Wechselwirkung mit anderen Komponenten bei PCR-Reaktionen verringertZum Beispiel ist Mg2+ ein wesentlicher Cofaktor für DNA-Polymerase, aber übermäßige oder unzureichende Mengen können die Amplifikationswirksamkeit beeinträchtigen.Die schwach saure Umgebung von MES trägt dazu bei, die Löslichkeit und die aktive Form von Mg 2 + aufrechtzuerhalten., wodurch eine Verringerung der effektiven Konzentration durch die Bindung von Puffermitteln an Metallionen vermieden wird.Verringerung der Wahrscheinlichkeit einer Primardimerisation oder nicht passender Verstärkung, die eine Garantie für die Gewinnung hochspezifischer Produkte bietet.

3,Temperaturanpassungsfähigkeit

Die PCR-Reaktion erfordert einen Zyklus zwischen hohen und niedrigen Temperaturen, was die Stabilität des Puffers erheblich beeinträchtigt.während der Hochtemperaturphase, wird die Pufferfähigkeit nicht von der Temperatur beeinflusst, und der pH-Wert bleibt stabil; während der Niedertemperaturbrennphase kann er schnell den Gleichgewichtszustand wiederherstellen,Gewährleistung einer präzisen Bindung von Primer und VorlagenDiese Eigenschaft macht die MES zu einer idealen Wahl für die PCR mit langen Fragmenten oder für die PCR mit hoher Treue - die erstere erfordert eine längere Verlängerung.während letztere auf die anhaltend hohe Aktivität des Enzyms beruht, und die stabile Pufferwirkung von MES bietet für beide eine zuverlässige Unterstützung.

Produktverpackung

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