Die Geheimnisse des hochreinen Biobuffers HEPES CAS 7365-45-9 erforschen

Die Laktatdehydrogenase (LDH), als eines der wichtigsten Enzyme im intrazellulären Glykolyseweg, unterliegt unter verschiedenen pathologischen Bedingungen Veränderungen ihrer Aktivität.Eine genaue Messung der LDH-Aktivität ist nicht nur für die wissenschaftliche Grundlagenforschung von großer BedeutungDie Wahl des geeigneten Puffers ist einer der wichtigsten Faktoren, um die Genauigkeit der Testergebnisse während dieses Prozesses zu gewährleisten.

Hydroxyethylpiperazinethansulfonsäure (HEPES-Puffer), als weit verbreiteter biologischer Puffer, wird allmählich zum Kernbestandteil von Laktat-Dehydrogenase-Detektionskits.In diesem Artikel wird aus mehreren Perspektiven die Schlüsselrolle von HEPES bei der Detektion von Laktatdehydrogenase eingehend analysiert., einschließlich seiner Bedeutung und Anwendung bei der Erkennung von LDH.

HEPES-Pulver

Die Bedeutung von HEPES bei der Detektion von Laktatdehydrogenase

Die Redoxreaktion zwischen Laktat und Pyruvat, die durch LDH katalysiert wird, erfordert einen spezifischen pH-Bereich, um eine optimale Aktivität zu zeigen.die Aktivität des Enzyms kann abnehmen oder sogar vollständig verloren gehenDaher ist das Hinzufügen von Puffermitteln zum Nachweissystem der Laktat-Dehydrogenase ein wichtiger Schritt zur Gewährleistung der Nachweisschärfe.

HEPES spielt aufgrund seiner hervorragenden Pufferleistung eine entscheidende Rolle in Laktat-Dehydrogenase-Detektionssätzen.Dies ist eine reversible Reaktion., und bei hoher Milchsäurekonzentration fördert sie die umgekehrte Reaktion, d. h. die Synthese von Pyruvinsäure aus Milchsäure.,L-Milchsäure reagiert mit NAD+ und erzeugt Pyruvinsäure und NADH. NADH weist eine charakteristische Absorptionsfähigkeit bei einer Wellenlänge von 340 nm auf.was bedeutet, dass die LDH-Aktivität durch Überwachung von Absorptionsänderungen quantifiziert werden kannDaher gewährleistet HEPES nicht nur die pH-Stabilität des Reaktionssystems, sondern stellt auch eine Garantie für eine genaue Bestimmung des Lactat-Dehydrogenase-Gehalts dar.

Anwendung von HEPES im Lactat-Dehydrogenase-Detektions-Kit

Das für den Nachweis von Laktatdehydrogenase verwendete Reagenz-Kit besteht in der Regel aus unabhängigen Reagenzien I und II.

Im Reagens I wirkt HEPES als biologischer Puffer und bildet ein Reaktionssystem mit Metallionenkomplexen, LDH-Substraten, Tensiden, LDH-Enzymaktivierern, Konservierungsmitteln und Wasser.HEPES ist hauptsächlich für die Aufrechterhaltung der pH-Stabilität des Reaktionssystems und die Bereitstellung einer geeigneten Reaktionsumgebung für das Substrat von Laktat-Dehydrogenase verantwortlichGleichzeitig interagiert es mit Metallionenkomplexen, um sicherzustellen, dass Metallionen (wie Zinkionen in Laktatdehydrogenase) in einem stabilen chemischen Zustand sind.Aufrechterhaltung der aktiven Konformation des EnzymsDarüber hinaus können Tenside, Enzymaktivatoren und andere Komponenten Reaktionen in der stabilen pH-Umgebung, die durch HEPES erzeugt wird, besser fördern.

In Reagent II existiert HEPES auch und arbeitet zusammen mit Nikotinamid-Adenin-Dinukleotid-Oxidationszustand (NAD +), Tenside, Konservierungsmittel und Wasser.als Coenzym in Laktat-Dehydrogenase-katalysierten Reaktionen, ist bei den Redoxreaktionen, an denen es teilnimmt, sehr pH-empfindlich.HEPES kann sicherstellen, dass NAD + unter geeigneten pH-Bedingungen mit Laktatdehydrogenase synergisiert, um den Substrat-Redox-Prozess abzuschließenDarüber hinaus arbeitet HEPES auch mit Konservierungsmitteln zusammen, um die Stabilität von Reagenz II aufrechtzuerhalten und die Haltbarkeit des Reagenzkit zu verlängern.

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