CAS 5625-37-6 gute Pufferlösungen LEITET Piperazine-1,4-Diethanesulfonic Säure

Der vollständige Name von PIPES-Puffer ist Piperazine-1,4-Diethansulfonsäure, eine Substanz, die den pH-Wert der Lösung in einem bestimmten Bereich halten kann.Wenn man zu einigen Lösungen eine bestimmte Menge Säure und Alkali hinzufügt, hat es die Wirkung, die pH-Veränderung der Lösung zu behindern, was als Pufferfunktion bezeichnet wird.biologischer PufferEine solche Lösung wird als Pufferlösung bezeichnet. PIPES ist ein wichtiges Mitglied des Goods-Puffers.der an biochemischen Prozessen nicht teilnimmt und diese nicht beeinträchtigt.
 
Grundlegende Informationen
 

 
Anwendung von PIPES
 
Es kann mit den meisten Metallionen keine stabilen Komplexe bilden und eignet sich als Puffer in Lösungssystemen mit Metallionen.Es wurde bei der Reinigung von Tubulin mit Hilfe von Cellulosephosphatchromatographie angewendetDie gereinigten rekombinanten GTP-bindenden Proteine ARF1 und ARF2 wurden durch Gelfiltration gereinigt und als Puffer zur Kristallisierung des Ketoenzyms aus E. coli verwendet.weil PIPES freie Radikale bilden kann, ist es nicht für Redox-Systeme geeignet.Bei der Kationenaustauschchromatographie sollte eine geringe Konzentration der PIPES-Pufferlösung verwendet werden, da PIPES eine relativ hohe Ionenfestigkeit aufweist und sein pKa-Wert konzentrationsabhängig ist..
 

PIPES-Puffer
 
Vorteile von PIPES
 
Die Reinheit (> 99%) ist wasserlöslich, der Prozess stabil und das Erscheinungsbild des Produkts kann als reines weißes Kristallpulver garantiert werden.
 
Piperazine-Diethansulfonsäure PIPES verfügt über verschiedene Puffersysteme,unter denen die Pufferlösung Transformation Buffer (auch TB-Lösung genannt) zur Vorbereitung hocheffizienter kompetenter Zellen verwendet werden kann.
Competent state refers to a special physiological state in which cells (or bacteria) can take up DNA molecules from the surrounding environment and are not easily broken down by restriction endonucleases in the cellEinige Bakterien sind natürlich kompetent, wie z.B. Bacillus subtilis, und einige sind künstlich kompetent, wie z.B. Escherichia coli.Die Behandlung der Empfängerzellen mit einer speziellen Methode kann die Durchlässigkeit der Zellmembran verändern, was es zu einer kompetenten Zelle macht, die es Trägermolekülen mit fremder DNA erlaubt, durchzusteigen.
Vorbereitung des Transformationspuffers:
 

Bei der Umwandlung kompetenter Bakterienzellen wird das Calciumchloridverfahren angewandt.37 Grad über Nacht, bis eine einzige Kolonie wächst.Wählen Sie eine Kolonie mit einem Durchmesser von 1-3 mm aus, um das SOB-Medium in einem 250 ml/3 l Erlenmeyer-Flaschen oder 80 ml/1 l Erlenmeyer-Flaschen zu impfen.Stoppen Sie die Kultur, wenn die OD600 bei 0 liegt..4-0.8, 10 Minuten in 4 Grad Eiswasser abkühlen, 15 Minuten bei 300 RPM zentrifugieren, die Bakterien nach dem Entfernen des Supernatants wiederherstellen, in 1/3 Volumen eiskalte TB-Lösung suspendieren,und wieder für 10 Minuten zentriformieren, um die Bakterien wiederherzustellen. mit einem Volumen von 1/12,5 TB suspendiert, DMSO mit einer Endkonzentration von 7% hinzugefügt, dann 10 Minuten lang in 0,1-1 ml Aliquoten gekühlt und direkt in flüssigem Stickstoff oder bei -80°C gelagert.
 

Produktverpackung
In der TB-Lösung aus suspendiertem Escherichia coli enthalten die Hauptbestandteile Puffer-PIPES und Calciumchlorid, um Zellen in kompetente Zellen umzuwandeln.Es ist zu beachten, dass diese Methode für E. coli-Stämme, die keine Plasmide enthalten und für große Plasmide nicht geeignet sind.die optimale OD600 der verschiedenen Bakterienstämme ist ebenfalls unterschiedlich, und muss je nach Versuch angepasst werden.
Es gibt viele Methoden zur Herstellung kompetenter Zellen mit Tuberkulose, und die Wirksamkeit der verschiedenen Methoden kann unterschiedlich sein, und auch die anwendbaren Stämme oder Zelltypen können unterschiedlich sein.PIPES-PufferDer von Desheng hergestellte Stoff ist ein Pulverreagenz, und entsprechend den unterschiedlichen Bedürfnissen können kompetente TB-Lösungen hergestellt werden.