Puffer-Konfigurations-Methode und Anwendung pH 10 Tromethamine Tris

Die Vorteile und die Nachteile der Tris-Pufferkonfigurationsmethode und -anwendung

Der chinesische Produktname von Tris ist tris (Hydroxymethyl-) aminomethane; tromethamine; tromethamine; 2 amino-2- (Hydroxymethyl-) - 1,3-propanediol. Es ist ein weißer Kristall oder ein Pulver. Lösliches im Äthanol und in Wasser, etwas löslichem im Ethylacetat und in Benzol, ätzend zu kupfernem und zu Aluminium und Reizungschemikalien.

Tris hat eine hohe Pufferkapazität, hohe Wasserlöslichkeit, und ist zu vielen enzymatischen Reaktionen träge und macht Tris einen sehr zufriedenstellenden Puffer zu vielen biochemischen Zwecken. Verwendete im Allgemeinen, um den pH des Reaktionssystems, mit einer starken Dämpfungsfähigkeit zwischen pH 7.5-9.0 zu stabilisieren.

Vorteile von Tris-Puffer:

①Weil die Tris-Basis in hohem Grade alkalisch ist, kann dieses Puffersystem benutzt werden, um Puffer mit einer breiten Palette von pH-Werten vorzubereiten, die von säurehaltigem bis zu alkalischem reichen;

②Es hat wenig Störung zum biochemischen Prozess und führt nicht mit Kalzium, Magnesiumionen und Schwermetallionen herbei.

Nachteile von Tris-Puffer:

①Der pH des Puffers wird groß durch die Konzentration der Lösung beeinflußt, wird der Puffer zehnmal verdünnt, und die pH-Veränderung ist größer als 0,1;

②Der Temperatureffekt ist groß, und der Temperaturwechsel hat einen großen Einfluss auf das pH der Pufferlösung, △pKa/℃=-0.031, zum Beispiel: der pH der Pufferlösung an 4℃=8.4, dann am pH=7.4 an 37℃, also an ihm muss, bei der Temperatur des Gebrauches sich vorzubereiten sein. Der Puffer Tris-HCl, der kann vorbereitet wird nicht an 0℃~4℃ bei Zimmertemperatur, benutzt werden;

③Es ist einfach, CO2 in der Luft zu absorbieren, also sollte der vorbereitete Puffer fest versiegelt werden;

④Dieser Puffer hat einen bestimmten Störungseffekt auf einige pH-Elektroden, so eine Elektrode, die mit Tris-Lösung kompatibel ist, sollte verwendet werden.

Tris-Puffer-Konfigurationsmethode:

Es gibt zwei Möglichkeiten, Puffer Tris-HCl vorzubereiten: bereiten Sie 0,05 mol/L Tris und 0,05 mol/L HCl-Lösungen beziehungsweise und dann Mischung entsprechend den Volumen vor, die in der allgemeinen Tabelle aufgelistet werden. Jedoch weil Standardkonzentration der verdünnten Salzsäure nicht einfach sich vorzubereiten ist, ist eine andere Methode allgemein verwendet: Nehmen Sie der Konfiguration von 1 L 0,1 mol/L Tris-HCl-Puffer als Beispiel: wiegen Sie zuerst 12,11 g Tris die Basis und in 950 ml entionisiertem Wasser mL~970 sich aufzulösen, beim Rühren, addieren Sie 4 N HCl tropfenweise, benutzen Sie ein pH-Meter, um das pH der Lösung zum gewünschten pH zu messen, und addieren Sie dann Wasser, um zu 1 L. zu bilden.

Strecke Tris-Puffers pH:

Tris-Puffer ist ein weitverbreiteter Puffer in der biochemischen Forschung. Seine allgemein verwendete effektive pH-Strecke ist in der „neutralen“ Strecke, wie:

Puffer Tris-HCl: pH=7.5~8.5

Tris-Phosphatpuffer: pH=5.0~9.0

Anwendung der Tris-Pufferlösung:

Im Elektrophoresepuffer bildet es ein Puffersystem mit Glycin, um den pH zu stabilisieren; benutzt das System des Puffers Tris-HCl im Gel, um den pH zu stabilisieren; er ist als Lösungsmittel für Nukleinsäuren und Proteine weitverbreitet; die niedrige Ionenstärke von Tris-Puffer kann für Fadenwürmer Bildung von Zwischenfasern auch verwendet werden; fügen Sie EDTA Tris Salzsäurepuffer hinzu, um „TE-Puffer“ zu machen, der für DNA-Stabilisierung und -speicher benutzt werden kann; ändern Sie die pH-justierende saure Lösung zur Essigsäure, um „TAE-Puffer“ zu erreichen, ersetzen Sie sie durch Borsäure ist verfügbar als TBE-Puffer. Diese zwei Puffer sind in den Nukleinsäureelektrophoreseexperimenten häufig benutzt.