Art weiße kristallene HEPES-Pufferlösung CAS Nos 7365-45-9 AR

Vorbereitung und Anwendung von 2 - (4 - (2-hydroxyethyl) piperazin-1-yl) ethanesulfonic saurer Puffer

Bei Zellkultur ist HEPES häufig unentbehrlich. In offenen Kulturzuständen wenn HEPES addiert wird, kann es die Zunahme von pH-Oxidation des Kulturmediums verhindern, um den pH an ungefähr 7,0 beizubehalten, die Pufferkapazität des Viruskulturmediums effektiv zu verbessern, eine passende Umwelt für das Virus zur Verfügung zu stellen und fördert die Stabilität von Viruspartikeln. Darüber hinaus kann es die Struktur und die Funktion des Enzyms bei der niedrigen Temperatur besser beibehalten. Wie über die Vorbereitung und den Gebrauch von HEPES-Puffer? Lassen Sie uns Ihnen eine kurze Einleitung geben.

Verschiedene Literaturen haben verschiedene Ansichten über die Vorbereitung der HEPES-Pufferlösung. Entsprechend dem Gebrauch ist man HEPES + NaOH, das andere ist HEPES + Salz rein. Verschiedene Vorbereitungsmethoden werden zusammengefasst, wie folgt:

1, Vorbereitung von 500 ml 1 m HEPES, pH = 7,0, Stammlösung

Lösen Sie 119,15 g HEPES im destillierten Wasser 400ml auf, addieren Sie 0,5 | wässerige Lösung 1m NaOH, zum mindestens des erforderlichen pH zu justieren (die effektive pH-Strecke HEPES ist 6,8 | 8,2), dann befestigt das Volumen an 500ml mit destilliertem Wasser und Speicher bei ℃ 4.

2, HEPES-Pufferformel mit kleiner Menge Salz (500ml)

HEPES 6.5g, NaCl 8.0g, na2hpo4.7h2o 0.198g, justieren pH mit 0.5m NaOH-Lösung, * und reparieren dann Volumen.

3, Vorbereitung 2 × HEPES der Puffer-Salzlösung

Lösen Sie KCl NaCl 1.6g, 0.074g, Dextran 0.027g na2hpo4.2h2o, 0.2g und 1g HEPES im destillierten Wasser 90ml auf, justieren Sie auf das erforderliche pH mit 0.5m NaOH, und befestigen Sie dann das Volumen an 100ml mit destilliertem Wasser.

Es gibt zwei Möglichkeiten, HEPES zu verwenden

(1) kann HEPES in das vorbereitete Kulturmedium entsprechend der erforderlichen Konzentration direkt hinzugefügt werden, und dann gefiltert werden, um Bakterien zu entfernen. Fügen Sie 2.38g HEPES in jedes Medium der Kultur 1000ml hinzu, justieren Sie pH bis 7,2 mit LN NaOH nach der Auflösung, Filter und Gebrauch nach Sterilisation. Die Konzentration von HEPES war 10 mmol/l.

(2) kann es in 100 x-Speicherlösung (L Mol/L) auch gemacht werden. Vor Gebrauch fügen Sie 99 ml-Kulturlösung in 1 ml-Speicherlösung, hinzu * die abschließende Anwendungskonzentration ist noch 10 mmol/l. Methoden: 23.8g HEPES wurde im destillierten Wasser des Doppelten 90ml aufgelöst, justiert auf pH 7.5-8.0 mit LN NaOH und verdünnt dann zu 100ml mit Wasser, gefiltert und entkeimt, Subvention verpackt worden in die kleinen Flaschen (2ml/Flasche), gespeichert bei ℃ 4 oder - ℃ 20.

Die abschließende Konzentration von HES ist 50 mmol/l, und sie muss gemerkt werden, dass PES zu den Zellen ungiftig ist. Im allgemeinen kann die Pufferkapazität von HEPES mit einer Konzentration von 20mmol/von mir erzielt werden, und es ist OKAY, damit wir richtig und flexibel sie entsprechend der tatsächlichen Situation vorbereiten.

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