Katalytische Reaktion und Nachweisprinzip der Glutamat-Dehydrogenase GLDH

Glutamatdehydrogenase(GLDH) oder GDH ist ein Enzym, das mit dem Aminosäuremetabolismus in vivo zusammenhängt, in Leber-, Gehirn- und Nierengewebe vorhanden ist und häufig als Nachweisindikator für Lebererkrankungen verwendet wird.GLDH kann die Dehydrierung von L-Glutaminsäure zur Herstellung von Alpha-Ketoglutarsäure katalysieren, der in den Tricarboxylsäurezyklus eintritt.

Glutaminsäure ist eine saure Aminosäure mit zwei Carboxylgruppen in ihrem Molekül.Es nimmt an vielen wichtigen chemischen Reaktionen bei Tieren teil.Glutaminsäure (2-Aminoglutarsäure) besteht aus drei Isomeren, dem linken Isomer, dem rechten Isomer und dem razemischen Isomer.und die Glutamatdehydrogenase, die zur Dehydrierung (oxidative Entamination) fähig ist, ist L-Glutaminsäure.

Glutamatdehydrogenase

Glutamatdehydrogenase ist hauptsächlich in den Mitochondrien von Leber-, Herz- und Nierenzellen vorhanden, mit geringen Mengen in den Mitochondrien von Gehirn, Skelettmuskeln und weißen Blutkörperchen.Zusätzlich zur Katalyse der reversiblen Reaktion der L-Glutaminsäure-Dehydrierung, hat es auch die Funktion, andere Aminosäuren zu katalysieren, wie die Katalysation der Oxidation von L-Valin, L-2-Aminobuttersäure und L-Leucin-Deamination.

Prinzip der Glutamatdehydrogenase GDH-Erkennung:

Das Prinzip der Aktivitätsdetektion der Glutamatdehydrogenase GLDH-Reaktionsgleichung des fertigen Produkts:α - Ketoglutarat α - Ketoglutarat+NH3+NADH+H+ wird durch Glutamatdehydrogenase zur Erzeugung von Glutamat GLDH+NAD++H2O NADH katalysiertReagenzmittel: Ein 0,1 M Tris-HCl-Puffer, pH 8,3 B 1,5 M NH4Cl-Lösung C 0,225 M α - Ketoglutarsäure-Lösung (pH 7,0-9,0) D 7,5 mM NADH-Lösung E Enzymverdünner: 0,1 M Tris-HCl-Puffer, pH 8.3Der Verbrauch von NADH kann durch Messung der Lichtabsorption bei 340 nm ermittelt werden. Messzeit: 180 s Verzögerungszeit: 60 s Integrationszeit: 120 s Koeffizient/Faktor: 6.776 Messtemperatur:30 ± 1 °C 3.2 Probenvorbereitung Wenn die zu prüfende Probe fest ist, kann sie in einem Verhältnis von 10 mg Probe/1000ul Ultrareinwasser gelöst werden.

Glutamatdehydrogenase ist ein sehr wichtiges Enzym in der Leber, das am Stoffwechsel von Glutamat, Alpha-Ketoglutarat und anderen Aminosäuren beteiligt ist.Der Nachweis des Serum-GDH-Gehalts ist ein wichtiger Indikator dafür, ob der Körper gesund ist.Die von Desheng bereitgestellte GDH-Enzympräparate sind der Rohstoff des Reagenz-Kits, der hauptsächlich für biochemische Detektion und verwandte Forschungsexperimente verwendet wird.

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