Welcher Puffer Tris oder EPPS ist passend, damit Folinphenolmethode Protein ermittelt?

Die Pufferstrecke Tris ist ungefähr 6-8, das für die meisten biochemischen Experimente, besonders in den in Verbindung stehenden Forschungsexperimenten des Proteins und der Nukleinsäure passend ist; EPPS ist auch für Protein und Nukleinsäure passend. Das Forschungsexperiment ist teurer als Tris, also ist welches passend, damit die Folinphenolmethode Proteinexperiment ermittelt?

Die Folin-Phenolreagensmethode ist eine grundlegende Methode, die, Proteinkonzentration zu bestimmen allgemein verwendet ist und ist auf dem Gebiet von Biochemie weitverbreitet gewesen. In den praktischen Anwendungen wird EPPS (HEPPS) normalerweise als Puffer verwendet, damit Folinphenolmethode Proteingehalt, eher als mit Tris-Puffer ermittelt.

Puffer Tris und EPPS werden für Proteingehaltentdeckung benutzt

Das Färbungsprinzip der Folinphenolmethode für die Bestimmung des Proteingehalts ist das selbe wie das der Biuretmethode (aber des EPPS kann nicht für Biuret/Biuretentdeckung verwendet werden). Der Unterschied ist, dass das zweite Reagens, das Folin-Phenolreagens, addiert wird. Zwecks die Menge von Farbe erhöhen, die Empfindlichkeit der Entdeckung von Proteinen dadurch verbessernd. Der Vorteil der Folinphenolmethode für die Entdeckung des Proteingehalts ist, dass er hohe Empfindlichkeit hat und ist viel empfindlicher als die Biuretmethode. Selbstverständlich hat er auch einige Nachteile, dass es eine lange Zeit dauert, die Standardkurve ist nicht gerade, ist die Besonderheit arm, und es gibt mehr Störungssubstanzen.

Irgendeine Gruppe, die die Biuretreaktion, wie - CO-NH2, - CH2-NH2, CS-NH2 und Tris-Puffer, Saccharose, Ammoniumsulfat und Sulfhydrylmittel behindert, kann die Folin-Phenolreaktion behindern und die größeren letzteren beeinflussen viel. Darüber hinaus Phenole und Zitronensäure auch diese Reaktion behindern.

Folin-Phenolreagens besteht aus zwei Reagenzien. Reagens man besteht Natriumkarbonat, Natriumhydroxid, kupfernem Sulfat und aus Kaliumnatriumtartrat. Die Peptidbindung im Protein reagiert mit der Kaliumnatriumkupfer-Tartratlösung unter alkalischen Bedingungen, um einen purpurrot-roten Komplex zu bilden. Das zweite Reagens wird aus phosphomolybdäner Säure, Phosphowolfram- Säure, Schwefelsäure, Brom und so weiter verfasst. Unter alkalischen Bedingungen wird dieses Reagens leicht durch die phenoplastische Gruppe des Tyrosins im Protein verringert, um eine blaue Reaktion zu geben, und seine Farbintensität ist zum Proteingehalt proportional. Diese Methode ist auch für die Bestimmung des Inhalts des Tyrosins und des Tryptophans passend. Der Messbereich dieser Methode ist Protein 25-250μg.

Zusammenfassend ist der Vorteil der Folinphenolmethode für die Bestimmung des Proteingehalts hohe Empfindlichkeit, aber der Nachteil ist, dass es eine lange Zeit dauert und behindert. Tris kann Störung auch verursachen. EPPS-Puffer sollte benutzt werden. Desheng produziert beide Puffer, um nicht zu sagen, ist welches besser, aber für verschiedene experimentelle Studien passend sein.