Einige Faktoren, die vor Chemolumineszenzreaktion betrachtet werden müssen

Der Chemilumineszenztest wird aufgrund seiner hervorragenden Erkennungsempfindlichkeit immer beliebter.LuminolIn der chemischen Analyse werden Chemilumineszenzreaktionen verwendet, um Analyten zu erkennen, die direkt kovalent mit Chemilumineszenzverbindungen gekennzeichnet sind.Die Auslösung eines chemilumineszierenden Etiketts für eine lumineszierende Reaktion erzeugt ein Signal für die Detektion des AnalytenDer Vorteil dieser Methode besteht darin, dass sie einfacher und klarer ist und die Notwendigkeit größerer, relativ "klebriger" Etiketten vermeidet.ob es sich um ein Enzymetikett oder ein direktes Etikett handelt, und wie die Lichtintensität bestimmt werden kann, muss vor der Konzeption der Reaktion berücksichtigt werden.

Enzymkennzeichnung oder direkte Kennzeichnung? Die gängige Methode zur Erzeugung von Chemilumineszenz besteht darin, gekennzeichnete Enzyme zu verwenden, um die Chemilumineszenzreaktion zu katalysieren.Jedes Etikett kann mehrere Chemilumineszenzreaktionen auslösenDie chemilumineszierende Verbindung wird übermäßig als Enzymsubstrat zur Sicherstellung der Sättigungskinetik geliefert.Die Lichtintensität ist eine lineare Funktion der Menge des gekennzeichneten EnzymsDie Intensität, die Emissionsrate von Photonen pro Sekunde, ist das Produkt der katalytischen Umwandlung des Substrats und der Lebensdauer der leuchtenden Verbindung.

Die chemilumineszierende Intensität/Zeitverteilungsgrafik umfasst eine anfängliche Anstiegsphase und die Erweiterung der Lumineszenz bis zum Plateau oder falschem Plateau.Es zeigt an, dass das Substrat erschöpft oder das Enzym inaktiviert ist.Der Nachweis der Chemilumineszenz, die durch Enzyme erzeugt wird, bietet eine große Flexibilität im Messverfahren.Die Lichtintensität an einem beliebigen Zeitpunkt, an dem der Höhepunkt erreicht wird, kann mit der Menge des Enzyms in Verbindung gebracht werden.Wenn die Geschwindigkeit ein Ein- oder Mehrpunkt-Neigungstyp-Messproblem ist, kann sie im aufsteigenden Teil gemessen werden.es gibt nicht viele geeignete chemilumineszierende VerbindungenDie geeigneten Kandidaten müssen zunächst bestimmte Funktionen haben, um eine Verbindung mit anderen Molekülen zu ermöglichen.Es sollte das gesamte Licht in kürzester Zeit emittieren..

Wenn Chemilumineszenz über einen bestimmten Zeitraum allmählich emittiert wird, nimmt die Signalintensität (Photonen/Sekunde) ab.und es ist am besten, die optimale Anzahl der Chemilumineszenz-Kennzeichen für die zu ermittelnden Arten auf der Grundlage der Erfahrungen zu bestimmenAuch wenn theoretisch mehr Tags mehr Photonen liefern sollten, wird bei zu engerem Abstand der Tags ein Dämpfungseffekt entstehen.Die Oberfläche und die Anzahl der abgeleiteten Gruppen (in der Regel Amino- oder Mercapto-Gruppen) bieten weitere Einschränkungen.In der Praxis können bis zu 10-20 Etiketten an ein Makromolekül gebunden werden.je wahrscheinlicher ist, dass das Etikett seine Bindungsmerkmale beeinträchtigt.

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