Schutzwirkung von tris (Hydroxymethyl-) aminomethane auf DNA-Strangs-Brüchen

Die Strahlenschädigung der DNA erfolgt in der Regel auf zwei Arten: direkt und indirekt.Die indirekte Wirkung besteht in der Radiolyse der Lösung um die DNA und der anschließenden Wechselwirkung zwischen DNA und den Produkten der Radiolyse..

Es wird geschätzt, daß 80% der tödlichen Wirkungen hoher LET-Strahlung durch direkte Wirkungen verursacht werden.Dies ist auch hilfreich, um den molekularen Mechanismus der hohen relativen biologischen Wirkung hoher LET-Strahlung zu klären..

TRIS-Basenpulver

Bei der Untersuchung der durch ionisierende Strahlung verursachten DNA-Schäden ist es offensichtlich hilfreich, genauere und zuverlässigere experimentelle Ergebnisse zu erhalten, um das geeignete DNA-Lösungssystem auszuwählen.Das häufigste Auflösungssystem der DNA ist der Puffer, und seine Hauptbestandteile sind 10 mmol/l Tris (Trimethylaminomethan) und 1 mmol/l EDTA (Ethylendiamin-Tetraessigsäure) bei pH 8.0Schauen wir uns die wichtigsten Prinzipien der Studie an.

PUC19 Plasmid-DNA in reinem Wasser gelöst, 10 mmol/lTris-Basis, 1 mmol / L led RA und te Puffer wurde durch 100 keV / p.m. Kohlenstoff-Ionenstrahl (Anfängliche Energie 290 MeV / U) bestrahlt.Der Anteil verschiedener DNA-Moleküle in verschiedenen Lösungen wurde durch Agarose-Gel-Elektrophorese analysiert, und die durchschnittliche Anzahl der Einzelstrangbrüche (SSB) und Doppelstrangbrüche (DSB) in jedem Plasmid wurde bei unterschiedlichen Dosen berechnet.

Es wurde festgestellt, dass Tris die Plasmid-DNA durch die Hemmung der Produktion von SSB und DSB signifikant vor der Strahlung durch kohlenstoffschwere Ionen schützen kann.Während EDTA die Produktion von SSB verstärken und die Bildung von DSB hemmen könnte.

Elektrophoretogramm des DNA-Moleküls pUC19 in unterschiedlicher Lösung und Bestrahlungsdosis

Aus der obigen Abbildung geht hervor, daß mit zunehmender Bestrahlungsdosierung der Anteil der übergewickelten DNA an der gesamten DNA abnimmt.Der Gehalt an supercoiled DNA in Tris und Te-Puffer sank langsam.Bei Erhöhung der Dosis auf 150Gy lag der Gehalt an supergewickelter DNA in Tris und dem Puffer immer noch über 80%, der Gehalt an supergewickelter DNA in EDTA und Wasser war jedoch unter 60%.Die Ergebnisse zeigten, daß die DNA in Tri weniger Strangbrüche erzeugt als in Wasser und EDTA..

Eine Reihe von Ergebnissen zeigt, dass Tris eine offensichtliche schützende Wirkung auf DNA-Strangbruchschäden hat, die durch 100 keV/L ~ m Kohlenstoff-Ionen-Bestrahlung induziert werden.die übergewickelte DNA bestand die ganze Zeit und zeigte einen offensichtlichen Schutz im Vergleich zu reinem Wasser und EDTA-Lösung.