Methode für das Stabilisieren des Enzyms und des chromogenen Substrates in Trinder-Reaktion

Im Bereich der In-vitro-Diagnostik ist die Enzym-Kolorimetrie eine gängige Methode zur quantitativen oder qualitativen Prüfung von Zielbestandteilen, die in China weit verbreitet ist.wie die Nachweismethode der Farbreaktion des durch das chromogene Substrat katalysierten Enzyms HRP- Das ist TOOS.Aufgrund der Beteiligung von Enzymen ist es sehr wertvoll, die Stabilität des Farbsubstrates mit Enzymaktivität zu verbessern.

Einige Reaktionsprodukte mit hoher molarer Absorptionsfähigkeit chromogener Substrate, wie TOOS, TOPS usw., können sowohl bei nassen chemischen Verfahren als auch bei trockenen chemischen Verfahren verwendet werden:die erforderlichen Reaktionsreagenzien (TOOS), 4-AAP) und die benötigten Enzyme (HRP) usw.) Es wird an den Membranträger befestigt, und die Probe wird tropfweise hinzugefügt, um H2O2 zu erzeugen und dann neuen ökologischen Sauerstoff freizusetzen,Oxidiert das Farbsubstrat, und indirekt die Zielkomponente durch die Menge des Reaktionsprodukts bestimmen. Enzyme sind hoch spezifisch und hoch effizient in der Katalyse.sie haben eine schlechte Stabilität unter dem Einfluss von TemperaturBei nassen chemischen Verfahren werden Enzyme leicht inaktiviert, wenn sie sich in einem flüssigen Zustand oder bei niedrigen Konzentrationen befinden.

Chromogenes Substrat TOOS-Pulver

Auf der anderen Seite werden die meisten chromogenen Substrate, wie TOOS, MAOS, TMB usw., ebenfalls leicht und langsam oxidiert, so dass ihre Lösungen nicht lange in die Luft ausgesetzt werden können.Es gibt viele Möglichkeiten, die Stabilität von biologisch aktiven Enzymen und chromogenen Substraten zu verbessern:

1Durch die Zugabe von Enzymlösungsschutzmitteln kann die Aktivität verschiedener Enzyme wie ALT, AST, LDH, ALP, CK in wässriger Lösung oder Serummatrix bei Raumtemperatur für 2 Wochen stabil bleiben.aber die Wirkung auf das trockene chemische Prüfpapier ist nicht signifikant.

2Die Farbentwicklungssubstratstabilisierungsmethode verwendet Tenside und Flavonoidpigmentstoffe mit einer Alkylgruppe mit 8 bis 16 Kohlenstoffatomen, aber die Formel ist kompliziert.Die Reagenzien sind schwer zu kaufen., und das Schutzmittel beeinträchtigt die Testergebnisse.

3Es gibt ein Schutzmittel, das reduzierbarer ist als das Farbentwicklungssubstrat, aber das hinzugefügte Schutzmittel enthält primäre Aminosäuren und verursacht oft unspezifische Reaktionen.

4Die Verwendung von Azofarbstoffen als Stabilisatoren des Farbentwicklungssubstrats hat eine gute Stabilisierungswirkung und verursacht keine Störungen.aber die maximale Absorptionswellenlänge des Farbstoffs ist manchmal nahe der des Farbstoffs, was die leere Kontrolle etwas höher macht.

5Ein Schutzmittel für Polymer und seine Zusammensetzung, das die Stabilität von Enzymen und chromogenen Substraten verbessern kann.für HRP geeignet, CHO usw. Enzym, geeignet für den Nachweis von Glukose, Kreatinin, Harnsäure, Cholesterin, Triglyceriden und anderen Indikatoren.

Es kann festgestellt werden, daß verschiedene bestehende Schutzmittel für Enzyme oderChromogene Substrate, von denen einige fehlerhaft sind, wie hohe Kosten, verzerrte Erkennung und nur für nasse chemische Methoden usw. geeignet sind,Die Methode bedarf weiterer Untersuchungen.Es wird empfohlen, mehr Aufmerksamkeit auf die Verwendung von chromogenen Substraten und Enzymen zu richten.