Methode für das Stabilisieren des Enzyms und des chromogenen Substrates in Trinder-Reaktion

Auf dem Gebiet von in-vitrodiagnosen, ist Enzymkolorimetrie eine allgemeine Methode für quantitative oder qualitative Prüfung von Zielkomponenten, und sie ist in China, wie der Nachweismethode der Farbreaktion des Enzyms weitverbreitet HRP, das durch das chromogene Substrat TOOS in der Trinder-Reaktion katalysiert wird. Wegen der Teilnahme von Enzymen, ist sie sehr wertvoll, die Stabilität des Enzymaktivitäts-Farbsubstrates zu verbessern.

Einige Reaktionsprodukte mit chromogenen Substraten der hohen molaren Absorption, wie TOOS, SPITZEN, etc., können in den nass chemischen Verfahren sowie in den trockenen chemischen Verfahren benutzt werden: die erforderlichen Reaktionsreagenzien (TOOS, 4-AAP) und die erforderlichen Enzyme (HRP) etc.) ist es auf der Membranfördermaschine örtlich festgelegt, und die Probe wird tropfenweise addiert, um H2O2 zu erzeugen und neuen ökologischen Sauerstoff dann freizugeben, das Farbsubstrat oxidiert und bestimmt indirekt die Zielkomponente durch die Menge des Reaktionsproduktes. Enzyme sind in hohem Grade spezifisch und in der Katalyse in hohem Grade leistungsfähig. Jedoch haben sie schlechte Stabilität unter Einfluss der Temperatur, des Drucks und des Lichtes in den trockenen chemischen Verfahren. In den nass chemischen Verfahren werden Enzyme leicht inaktiviert, wenn sie in einem flüssigen Zustand oder bei niedrigen Konzentrationen sind.

Chromogenes Pulver des Substrates TOOS

Andererseits, die meisten chromogenen Substrate, wie TOOS, MAOS, TMB, etc., werden auch leicht langsam oxidiert, also können ihre Lösungen nicht der Luft für eine lange Zeit ausgesetzt werden. Es gibt viele Weisen, die Stabilität von biologisch-aktiven Enzymen und von chromogenen Substraten zu verbessern:

1. Das Addieren des schützenden Mittels der Enzymlösung kann die Tätigkeit von den verschiedenen Enzymen wie Alt, AST, LDH, ALPE, CK bei Zimmertemperatur machen im Matrixstall der wässerigen Lösung oder des Serums für 2 Wochen, aber der Effekt auf trockenes chemisches Reagenzpapier ist nicht bedeutend.

2. Die Farbe-entwickelnde Substratstabilisierungsmethode benutzt Tenside und flavonoide Pigmentsubstanzen mit einer Alkylgruppe mit 8 bis 16 Kohlenstoffatomen, aber die Formel ist schwierig, sind die Reagenzien schwierig zu kaufen, und das schützende Mittel behindert die Testergebnisse.

3. Es gibt ein schützendes Mittel, das reduzierbarer als das Farbe-entwickelnde Substrat ist, aber das addierte schützende Mittel enthält Primäraminogruppen und verursacht häufig unspezifische Reaktionen.

4. Der Gebrauch von Azofarbstoffen als Stabilisatoren des Farbe-entwickelnden Substrates hat einen guten stabilisierenden Effekt und verursacht nicht Störung, aber die maximale Absorptionswellenlänge der Färbung ist manchmal nah an der des Farbe-entwickelnden Mittels, das die Leerzeichenaufbereitungssteuerung ein wenig höher macht.

5. Ein schützendes Mittel für Polymer und seine Zusammensetzung, die die Stabilität von Enzymen und von chromogenen Substraten verbessern können. Anwendbare chromogene Substrate schließen TOOS, 4-AA, SPITZE, MAOS, etc., passend sind für HRP, CHO, etc.-Enzym, passend sind für die Entdeckung der Glukose, des Kreatinins, der Harnsäure, des Cholesterins, des Triglyzerids und anderer Indikatoren mit ein.

Es kann gesehen werden, dass verschiedene vorhandene schützende Mittel für Enzyme oder chromogene Substrate, von denen einige, wie hohe Kosten, voreingenommene Entdeckung defekt sind, und nur passend für nass chemische Verfahren, etc., die Stabilität von Enzymen und von chromogenen Substraten folglich verbessernd benötigt die Methode weitere Forschung. Desheng ist ein Hersteller von chromogenen Substraten und von Enzymen. Es wird empfohlen, dass Sie mehr Aufmerksamkeit auf den Gebrauch der chromogenen Substrate und der Enzyme lenken.