Gebrauchsanweisung für den HEPES-Puffer

4-Hydroxyethylpiperazinethanesulfonsäure, bezeichnet alsHEPES, CAS-Nr. 7365-45-9, wird üblicherweise als biologischer Puffer in biochemischen Experimenten eingesetzt.

Physikalische und chemische Eigenschaften: HEPES

Molekulare Formel: C8H18N2O4S

Molekulares Gewicht: 238.31

Zustand: kristallines Pulver

pKa:7.45 bis 7.65

Pufferbereich: 6,8-8.2

Aufbau:

Reinheit: mehr als 99%

Verwendungskonzentration: 10-50 mmol/l

Abhängig von der Anwendung unterliegen HEPES-Puffer zweien häufig verwendeten Puffersystemen:

HEPES Pufferlösung: HEPES + NaOH (500 ml): 119,15 g HEPES wird in 400 ml destilliertem Wasser gelöst, 0,5 bis 1 ml NaOH wässrige Lösung hinzugefügt, um mindestens den erforderlichen pH-Wert anzupassen,beachten Sie, dass der effektive pH-Pufferbereich 6 beträgt..8 bis 8.2, und verwenden Sie dann destilliertes Wasser, um das Volumen auf 500 ml zu bringen;

2. HEPES Puffersalzlösung: HEPES 6,5 g, NaCl 8,0 g, Na2HPO4·7H2O 0,198 g, den pH-Wert mit 0,5 M NaOH wässriger Lösung einstellen und das Volumen auf 500 ml machen.

3.2×HEPES-Puffersalzlösung: 1,6 g NaCl, 0,074 g KCl, 0,027 g Na2HPO4.2H2O, 0,2 g Glucan oder Dextran und 1 g HEPES in 90 ml destilliertem Wasser auflösen,und den erforderlichen pH-Wert mit 0 anpassen.5M NaOH-Wert, dann auf 100 ml mit destilliertem Wasser verdünnt. Im Zell-Zell-Adhäsionsversuch enthält es Kalzium- und Magnesium-Ionen;HA-Zellkulturlösung enthält keine Kalzium- und Magnesium-Ionen, enthält jedoch BSA.

Die Vorteile des HEPES-Puffers:

1Im Gegensatz zu PEcine enthält HEPES keine Koordinationsgruppen und kann mit den meisten Metallionen keine stabilen Komplexe bilden.

2. HEPES hat eine sehr gute Wasserlöslichkeit und der Pufferbereich ist nahe dem Neutralen.Es ist also nicht für Redox-Systeme geeignet und hat relativ große Ionen- Stärke, PIPES ist saurer.

3. HEPES hat keine toxischen und Nebenwirkungen auf Zellen bei niedriger Konzentration und kann einen konstanten pH-Bereich für eine lange Zeit kontrollieren.und das allgemeine Kulturmedium enthält 20 mmol/L HEPES, um eine Pufferfähigkeit zu erreichenDaher wird es häufig in HA-Lösung, Zellkulturlösung, Viruskonservierungslösung und sogar Hautpflegeprodukten verwendet.

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