Wie wählen Sie die biologischen Puffer für Chromatographie?

Die Chromatographie wird häufig zur Trennung und Reinigung von Proteinen im Labor eingesetzt. In diesem Prozess hängen die PH-Variationen mit der Trennungsfähigkeit des Systems zusammen.Wenn der PH des Lösungsmittels nahe bei pKa liegt, beispielsweise können kleine PH-Änderungen die Retention und damit die Trennungsresultate stark beeinflussen.Da die Aufbewahrung ionisierbarer Verbindungen besonders empfindlich auf die PH-Variable.

Nach der einschlägigen Literatur in der Chromatographie haben wir festgestellt, dassTris-Basisund MES sind oft die besten Optionen für diese Technik, andere Puffer wurden auch in der Kationenaustauschchromatographie, Anionenaustauschchromatographie,Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) und andere ähnliche VerfahrenHier sind die 10 besten Puffer für Ihre Referenz.

1) BIS-TRIS-Puffer

Geeigneter PH-Bereich: 5,8 - 7.2

PKA (25°C): 6.46

Molekülgewicht: 209,2 g/mol

Als Puffer bei der Anionenaustauschchromatographie verwendet (Bedenken: mehrere Komponenten in einem chromatographischen System können um die Metallbindung mit diesem Puffer konkurrieren)

2) BES-Puffer

Geeigneter pH-Bereich: 6,4 - 7.8

PKA (25°C): 7.09

Molekülgewicht: 213,2 g/mol

Als Bindungspuffer und Eluat in der Kationenaustauschchromatographie / als Puffer in der Gelfiltrationschromatographie verwendet

3) Bicine-Puffer

Geeigneter pH-Bereich: 7,6 - 9.0

PKA (25°C): 8.26

Molekülgewicht: 163,2 g/mol

Als mobiler Phasenpuffer und Eluent in der Kationenaustauschchromatographie verwendet

4) CAPS-Puffer

Geeigneter pH-Bereich: 9,7 - 11.1

PKA (25°C): 10.40

Molekülgewicht: 221,32 g/mol

Als Bindungspuffer und Eluat bei der Kationenaustauschchromatographie verwendet

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5) HEPES-Puffer

Geeigneter pH-Bereich: 6,8 - 8.2

PKA (25°C): 7.48

Molekülgewicht: 238,3 g/mol

Als Bindungspuffer und Eluent in der Kationenaustauschchromatographie in einer zweistufigen Umkehrdialyse für die In-vitro-Ausgabeprüfung verwendet

6) MES-Puffer

Geeigneter pH-Bereich: 5,5 bis 6.7

PKA (25°C): 6.10

Molekülgewicht: 195,2 g/mol

Als Puffer in der Kapillar-Elektrochromatographie, Gelfiltrationschromatographie, Phosphocellulose-Säulenchromatographie, Hydrophobie-Interaktionschromatographie und Kationenaustauschchromatographie verwendet

7) MOPS-Puffer

Geeigneter PH-Bereich: 6,5 - 7.9

PKA (25°C): 7.14

Molekülgewicht: 209,3 g/mol

Als laufender Puffer für die Proteinreinigung in der Chromatographie verwendet

8) PIPES-Puffer

Geeigneter PH-Bereich: 6,1 - 7.5

PKA (25°C): 6.76

Molekülgewicht: 302,37 g/mol

Als Puffer in der Kationenaustauschchromatographie verwendet, sollte es aufgrund seiner hohen Ionenfestigkeit und der Abhängigkeit der Konzentration von pKa in niedrigeren Konzentrationen verwendet werden.Und ein Puffer in der Phosphocellulosechromatographie zur Reinigung von Mikrotubule-Proteinen

9) TAPS-Puffer

Geeigneter pH-Bereich: 7,7 - 9.1

PKA (25°C): 8.40

Molekülgewicht: 243,28 g/mol

Verwendet als Puffer bei der planaren Chromatographie zur Trennung von Farbstoffen und bei der Ionenwechselchromatographie zur Enzymreinigung14

10) Tris-Puffer

Geeigneter pH-Bereich: 7,5 bis 9.0

PKA (25°C): 8.06

Molekülgewicht: 121,14 g/mol

Verwendet als Puffer und Eluat in der Anionenaustauschchromatographie und in der Kapillar-Elektrochromatographie aufgrund seiner geringen Ionenmobilität

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