Wie Acridinium-Ester in der Entdeckung beschriften

Kennzeichnungsprinzip von Chemolumineszenzsubstrat acridinium Ester in den Diagnosereagenzien in Chemolumineszenz Immunoassay, beschriften wir das Antikörperprotein mit Acridinester zuerst, damit der Analyt nach der Immunreaktion ermittelt werden kann. In diesem Fall wie man den Antikörper ist sehr kritisch beschriftet. Acridinsalze und in Verbindung stehende Mittel sind weit die sehr nützlichen chemiluminescent Aufkleber gewesen worden und Radioisotope in der Stabilität, Aufkleberbesonderheit und Entdeckungsempfindlichkeit übertroffen. Der AcridinNHS-Ester, auch Name als Acridin succinimide Ester, Dose reagiert mit den Primäraminogruppen von Proteinen. Unter alkalischen Bedingungen wird NHS als verlassende Gruppe ersetzt und das Protein bildet eine stabile Amidbindung mit dem Acridinester. Nachdem die Reaktion abgeschlossen wurde, wurde das überschüssige acridinium Salz durch eine entsalzende Spalte entfernt. In Anwesenheit des alkalischen Wasserstoffperoxids Acridin-beschriftet Proteine kann Licht ohne enzymatische Katalyse ausstrahlen.

Deshalb veranlaßt die Einführung der Erregungslösung das Reaktionssystem, Photonen an ungefähr 430 Nanometer sofort freizugeben, und die Proteinkonzentration kann ermittelt werden, indem man die Anzahl von Photonen mit einem Standard-luminometer zählt. Weil dieser Lumineszenzprozeß innerhalb 2 Sekunden abgeschlossen wird, muss die Probe direkt vor dem Photondetektor innerhalb des Fotometers gesetzt werden. Proteine, Polypeptide, Antikörper und Nukleinsäuren können mit Acridinestern ganz beschriftet werden.

Was für Chemolumineszenzreagens gemerkt werden sollte, löst Acridin succinimide Ester mit ausschließlich anhydrousstrictly wasserfreiem DMF auf, um zu verhindern, dass der Acridinester hydrolysiert wird. Und er sollte in einer trockenen Dichtung an -20°C gespeichert werden, wenn nicht verwendet. Unterschiedlich zu traditionellem Acridinester, ist die Struktur von Acridin succinimide Ester geändert worden, um die sterische Behinderung zu erhöhen und den Hydrolysewiderstand zu erhöhen. Sie kann an der pH-Pufferlösung mit pH 7,0 stabil bei Zimmertemperatur sein.

Wenn die Acridincarbonsäure ohne - NHS, ist es notwendig, ein kondensierendes Vertreter wie EDCI, etc. hinzuzufügen, um eine Kopplungsreaktion mit einem Gruppe-enthaltenen Protein des Amins zu haben. Das Acridinhydrazid, freie Aminogruppe enthalten, ist für direkte Kopplung der Nukleinsäure des Polysaccharids oder der proteinhaltigen Aldehydegruppe am Ende des Acridinhydrazids passend.

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