HEPES-Puffer: der "unsichtbare Helfer" bei der Erkennung von Tollwutvirus

4-Hydroxyethylpiperazine-Ethansulfonsäure, abgekürzt alsHEPESEs erscheint als weißes kristallines Pulver und hat einen stabilen pH-Bereich zwischen 6,8 und 8.2Als biologisches Puffermittel ist die pH-Regulierung die häufigste Anwendung und wird von großen Herstellern im Bereich der Hautpflege sehr bevorzugt.Seine entscheidende Rolle bei der Erkennung von Tollwutvirus ist wenig bekannt., und wir werden eine ausführliche Einführung im Folgenden geben.

Das Dilemma der traditionellen Methoden zur Erkennung von Tollwutviren

Wenn sich das Tollwutvirus in infizierten Zellen vermehrt, verursacht es normalerweise keine zytopathischen Effekte (CPE) und es ist auch schwierig, Plaques unter konventionellen Kulturbedingungen zu bilden.Obwohl viele Wissenschaftler im In- und Ausland erfolgreich Tollwut-Virus-Plaque-Methoden auf Hühner Embryozellen und BHK-21 Zellen etabliert habenDiese Methoden haben offensichtliche Nachteile: Einige haben äußerst strenge Anforderungen an die Versuchsbedingungen, die eine präzise Kontrolle verschiedener Faktoren wie Temperatur, Luftfeuchtigkeit,GaszusammensetzungEinige Betriebsschritte sind kompliziert und erfordern eine langfristige Ausbildung von professionellen Technikern, um sie beherrschen zu können.Dies ist ein wichtiger Faktor für die Förderung und Anwendung dieser Methoden..

Durchbruch bei der Anwendung von HEPES bei der Erkennung von Tollwutviren

Forscher entdeckten versehentlich, daß HEPES die pathogene Wirkung des Tollwutim-Virus auf infizierte Zellen verstärken kann.Forscher haben eine einfache und schnelle HEPES-Plaque-Ätzmethode für das Tollwutvirus entwickelt.

HEPES fördert die Bildung von Korrosionsflecken erheblich

Im Experiment wurden infizierte Zellen 3-5 Tage lang bei 37 °C kultiviert, und dann wurde eine Gruppe infizierter Zellen mit HEPES behandelt.An der Unterseite der Abdeckung können offensichtliche zelluläre Läsionen deutlich beobachtet werden.Nachher wurde eine kristallviolette Färbung verwendet, und die Korrosionsflecken waren deutlich sichtbar.Die infizierte Zellgruppe ohne HEPES-Behandlung zeigte weder zytopathische Effekte noch Plaquebildung.Dieses experimentelle Ergebnis zeigt eindeutig, dass HEPES eine signifikante fördernde Wirkung auf die Plaquebildung des Tollwutvirus auf BHK-Zellen hat.

HEPES-Etschverfahren hat eine hohe Empfindlichkeit

Der HEPES-Plaque-Assay ist nicht nur einfach zu bedienen, sondern leistet auch eine gute Leistung bei der Titrierung von Virusinfektionstiteln.Experimentelle Daten zeigen, dass es einen eindeutigen Titerverhältnis zwischen der Anzahl der nach einer Virusinfektion gebildeten Plaques und der Verdünnung des Virus gibt.Die Infektionstiter wurden mit Hilfe des HEPES-Plaque-Assays bzw. des Maus-Assays bestimmt.Es wurde festgestellt, dass die Anzahl der mit der HEPES-Plaque-Methode gemessenen Plaques zwischen 1 und 10 lag.0,0 × 10 ° bis 4,0 × 10 * PFU/ml, während die mit der Mausmethode gemessenen Infektionstiter zwischen 6,0-6,8 log oder 1,0 × 10 ° bis 6,3 × 10/ml lagen.Dieses Ergebnis zeigt vollständig die Konsistenz der Empfindlichkeit zwischen der schnellen HEPES-Plaque-Methode und der Mausmethode..

Die HEPES-Ätzmethode bietet herausragende Vorteile

Bei der Untersuchung der Infektionstiter-Titration von Tollwutvirusstämmen CTN-181 und CTN-BNKEs wurde festgestellt, dass die Verwendung von HEPES die pathogene Wirkung des Tollwutvirus auf infizierte Zellen wirksam induzieren und verstärken kann.Die spezifische Methode ist wie folgt: Nach Virusinfektion von Zellen werden sie 3-5 Tage lang bei 37 °C kultiviert.50-100 mmol/L HEPES in Tropfform auf die Abdeckung des halbfesten Mediums Methylzellulose hinzufügen, nach 24 Stunden mit kristallviolettem Lösungsmittel beflecken und bei Raumtemperatur trocknen, um die Anzahl der Korrosionsflecken mit bloßem Auge direkt zu berechnen.Verglichen mit früheren Literaturberichten über Ätzmethoden, hat diese Methode viele Vorteile wie Geschwindigkeit, Einfachheit, Wirtschaftlichkeit, Sensibilität und Leichtigkeit der Beherrschung.

Das von der Firma Desheng hergestellte HEPES erreicht einen Reagenzgehalt mit einer Reinheit von mehr als 99%.Wir haben Kooperationsbeziehungen mit zahlreichen Herstellern aufgebaut. Für die Bequemlichkeit der Kundenerfahrung kann das Unternehmen kostenlose Proben zur Prüfung zur Verfügung stellen. Desheng wird sich immer an seine ursprüngliche Absicht halten und den Kunden qualitativ hochwertige Produkte bieten.Wenn Sie Fragen oder Bedürfnisse haben, klicken Sie bitte auf die offizielle Website, um weitere Details zu erfahren oder kontaktieren Sie mich direkt!