Vergleich von biologischen Puffern TAE und TBE

Bei der DNA-Elektrophorese werden immer Pufferlösungen hinzugefügt.

Was ist die Rolle des Puffers? Eine der Funktionen des Puffers ist es, den pH-Wert der Lösung stabil zu halten.eine Oxidationsreaktion an der Anode zur Erzeugung von Sauerstoff- und Wasserstoff-IonenBei einer langfristigen Elektrophorese werden die Anodensäure und die Kathode alkalisch.Ein gutes Puffersystem sollte eine starke Pufferfähigkeit aufweisen, um den pH-Wert der Lösung an beiden Polen grundsätzlich stabil zu haltenEine weitere Funktion des Elektrophoresepuffers besteht darin, die Lösung zu einer bestimmten Leitfähigkeit zu bringen, um die Migration von DNA-Molekülen zu erleichtern.DNA ist eine alkalische Substanz, die während der Elektrophorese (Puffer pH=8) negativ geladen wird und von der negativen Elektrode zur positiven Elektrode wandert.

Eine weitere Komponente des Elektrophoresepuffers ist EDTA, dessen Zweck es ist, Mg2+ Plasma zu chelatieren und die Aktivierung von DNase während der Elektrophorese zu verhindern.EDTA kann diese Ionen fest halten, um den Abbau von Nukleinsäuren zu vermeidenEs ist jedoch zu beachten, daß Magnesium-Ionen auch Kofaktoren vieler Enzyme sind, wie z. B. Restriktionsenzyme, DNA-Polymerasen usw.so dass die Konzentration von EDTA im Allgemeinen nicht zu hoch ist (in der Regel um 1mM).

DeshengTRIS-PufferVerpackung

Also, was ist besser, TAE oder TBE? in der Tat, was sollte ich für die DNA-Elektrophorese verwenden? Es hängt wirklich vom Zweck Ihres Experiments ab.

1. Die Leitfähigkeit von TBE ist größer als die von TAE. Daher ist es im Vergleich zu TAE weniger wahrscheinlich, dass TBE eine Überhitzung im Elektrophorese-Tank verursacht.TBE wird für die Langzeitelektrophoreze empfohlen.

2. Borsäure ist ein Enzymhemmer, so dass, wenn Sie Elektrophoresis-DNA für die Verdauungsreaktion zu trennen müssen, es empfohlen wird, TAE als die Elektrophoresis Pufferlösung

3Für Fragmente kleiner als 300 bp ist die Migrationsgeschwindigkeit in TBE bei einem 2%igen Agarose-Gel schneller.

4. TAE ist für die Trennung großer Fragmente geeignet. Fragmente größer als 2kb wandern schneller in TAE (in 0,8% Agarose-Gel) und die Geschwindigkeit ist etwa 10% schneller als in TBE.TAE eignet sich besser für die Wiederherstellung von DNA-FragmentenIm Vergleich zu TBE hat TAE eine höhere Auflösung für supergewickelte DNA.

Zusammenfassend lässt sich die Frage, ob TBE oder TAE besser ist, nicht verallgemeinern.Der von Desheng entwickelte biologische Puffer hat einen großen Pufferbereich.Das System kann Puffer mit einer Vielzahl von pH-Werten herstellen und verschiedene Verpackungsspezifikationen liefern.Willkommen zu konsultieren und zu kaufen.