Chromogensubstrat ÜBERSTEIGT Bestimmung von Schritten der freien Fettsäure

Die Bestimmung der freien Fettsäuren (FFA) im Serum ist ein wichtiger biochemischer Testindex, und FFA ist eng mit der menschlichen Gesundheit verbunden.Da die Komponenten des Serums komplex sind und es viele Arten von FFA gibt, wird die Detektion von vielen Faktoren beeinflusst, so dass das Chromogen-SubstratTopswird üblicherweise zur Bestimmung der FFA verwendet.

Chromogen-Substrat-TOPS-Reagenzium

Chromogen-TOPS-Bestimmung FFA-Schritte:

1In den Behälter wird zunächst die nach dem Formelverhältnis gewogene Pufferlösung zugesetzt und dann ATP, Coenzym A, 4-Aminoantipyrin, Ionenaktivierungsmittel (Magnesiumchlorid), Stabilisator (BSA),und Konservierungsmittel in AbfolgeNach dem Hinzufügen der richtigen Menge Wasser, hinzufügen Sie Tensid, passen Sie den pH-Wert auf pH 6-9 mit konzentrierter Salzsäure, hinzufügen Acyl-CoA-Synthase zuletzt, dann mischen und filtern,und dem Filtrat destilliertes Wasser hinzufügen, um Reagenz A quantitativ zu erhalten.

2. dem Behälter Puffer hinzufügen, dann Chromogen-TOPS, Wasser, abwechselnd Tensid hinzufügen, den pH-Wert auf pH 6-9 einstellen, schließlich HRP und Acetyl-CoA-Oxidase hinzufügen, dann rühren und filtern,und dann dem entstehenden Filtrat bis zu einer quantitativen Menge destilliertes Wasser hinzufügen, wird Reagent B erhalten..

3. Die oben genannten Reagenzien in Durchstechflaschen füllen und bei 2-8°C aufbewahren.und den Absorptionswert A1 lesen; das Reagenz B hinzufügen und gleichmäßig mischen, für einen bestimmten Zeitraum inkubieren und den Absorptionswert A2 ablesen.

Buffer vorbereiten:

In einem sauberen Glasbehälter wird zunächst HEPES-Puffer (Good-Puffer, zwitterionischer Puffer, einschließlich HEPES, Tris, MES, MOPS usw.) hinzugefügt, der nach dem Verhältnis der Formel gewogen wurde,geeignete Menge Wasser hinzufügen, und dann das Tensid 5 ml/l TritonX-100 hinzufügen, konzentrierte Salzsäure verwenden, um den pH-Wert auf pH 6-9 anzupassen, die Menge ist etwa 5 ml/l, dann rühren und filtern,und dem erhaltenen Filtrat anschließend bis zu einer bestimmten Menge destilliertes Wasser hinzufügen.

Die Methode zur Verwendung von TOPS alsChromogensubstratfür den Nachweis von Serum oder Plasma hat FFA eine hohe Genauigkeit und einen geringen Messfehler und ist die am besten geeignete Farbe unter den vielen Trinder-Chromogenen, die einen niedrigen Acetyl-CoA-Gehalt, eine hohe Stabilität aufweist,und einen hohen molaren AbsorptionskoeffizientenZu den von Desheng hergestellten Chromogensubstraten gehören neben TOPS auch TOOS, MAOS, ADPS usw., die sich für den Nachweis von Blutzucker und anderen biochemischen Indikatoren eignen.