Biologischer Puffer TES: Der "stabile Hüter" bei der DNA-Niederschlagung und -Extraktion

In molekularen Biologie-Experimenten sind DNA-Verschlagung und -Extraktion grundlegende Schritte in der Genforschung, der Klontechnologie und der Entwicklung diagnostischer Reagenzien.die Auswahl derbiologische PuffermittelWir haben eine Reihe von Fragen zu diesem Thema, die sich direkt auf die Reinheit, Integrität und experimentelle Effizienz der DNA auswirken.Trimethylmethylaminoethanesulfonsäure (TES-Puffer), hat aufgrund seiner einzigartigen physikalisch-chemischen Eigenschaften und Stabilität erhebliche Vorteile im Bereich der DNA-Manipulation gezeigt.

Die chemischen Eigenschaften von TES: wissenschaftliche Grundlage für die Pufferleistung

TES, der chemische Name ist 2-[ (trihydroxymethyl) methylamino] -1-Ethanesulfonsäure,und die Sulfonsäuregruppen und mehrere Hydroxylgruppen in seiner molekularen Struktur verleihen ihm eine ausgezeichnete PufferfähigkeitBei Raumtemperatur beträgt der pKa-Wert von TES 7.5, und der effektive Pufferbereich umfasst einen pH-Wert von 6,8 bis 8.2Im Vergleich zum traditionellen Puffer-Tris (Pufferbereich pH 7,0-9,0),TES weist eine stärkere Widerstandsfähigkeit gegen Temperaturänderungen auf und kann das Risiko einer niedrigtemperaturinduzierten DNA-Degradation wirksam vermeiden.

Dreifache Rolle bei der DNA-Extraktion

1Zelllysis und Proteinentfernung

Während der Zelllysestadium hemmt TES die Aktivität von DNA-Enzymen und schützt die genomische DNA vor dem Abbau durch Chelatierung von divalenten Metallionen (wie Mg 2 +, Ca 2 +) in der Lösung.Sein Puffersystem hält gleichzeitig den optimalen pH-Wert für Proteasen wie Protease K (in der Regel pH 7.5-8.0), die den Abbau von Zellmembranen und den Abbau von Proteinen beschleunigen.Experimente haben gezeigt, dass die Proteinentfernungseffizienz des Lysisystems mit TES-Puffer im Vergleich zu herkömmlichen Methoden um etwa 25% verbessert wird, die eine gute Grundlage für die nachfolgenden Reinigungsschritte bilden.

2. Selektive Regulierung der DNA-Verschlagung

TES ist eine zusammengesetzte Pufferlösung aus Tris-Salzsäure, EDTA und SDS (TES-EDTA-SDS), die durch Anpassung der Ionenfestigkeit der Lösung eine selektive Ausfällung von DNA erreicht.Bei hohen Salzkonzentrationen (z. B. 2.5M NaCl) wirken die Sulfonsäuregruppen von TES durch elektrostatische Abschirmung und fördern die Abstoßung von Phosphatgruppen zwischen DNA-Molekülen und bilden einen löslichen Zustand;Wenn die Salzkonzentration unter 0 fällt.5M, DNA-Aggregate und -Verschüttungen aufgrund der Exposition des Phosphat-Rückgrates. Dieser Prozess hat eine abstoßende Wirkung auf RNA und andere Verunreinigungen, was zu einer Reinheit der DNA-Wiederherstellung von über 95% führt.

3Schutz der Enzymaktivität

Die schützende Wirkung des TES-Puffers auf die Enzymaktivität ist besonders deutlich bei der Begrenzung von Enzymspaltreaktionen.Untersuchungen haben gezeigt, dass die Schneideffizienz von Restriktionsenzymen (wie EcoRI) mit TES-Reaktionssystem 18% -22% höher ist als die des HEPES-PuffersDer stabile pH-Wert reduziert die Konformationsveränderungen der Enzyme, verlängert die lineare Periode der Enzymspaltreaktionen und sorgt für die Genauigkeit von Genbearbeitungsversuchen.

Schlussfolgerung

Der TES-Puffer weist aufgrund seiner hervorragenden pH-Stabilität, Metallionenchelations-Eigenschaften und des Enzymschutzeffekts unersetzliche Vorteile bei der DNA-Verschlagung und -Extraktion auf.Durch die Optimierung der Versuchsbedingungen und die Erforschung neuer Anwendungsfälle, wird TES die molekulare Biologieforschung weiterhin in effizientere und präzisere Richtungen lenken.Die Bewältigung des Puffermechanismus und der Anwendungstechniken von TES ist zweifellos der Schlüssel zur Verbesserung der Erfolgsrate von Experimenten.

TES-Puffer wird nicht nur in der Kosmetik eingesetzt. Seine Puffer-Eigenschaften machen es zu einer wichtigen Rolle bei der Proteinanalyse, der Bestimmung der Enzymaktivität und der Zellkultur.TES-Puffer, Desheng kann hochreine und vielfältige Arten von Pufferrohstoffen liefern. Kunden können die Einzellagerung abschließen, Zeit und Kosten sparen.Bitte wenden Sie sich jederzeit an uns für den Kauf.!