Anwendung des Acridinesters, wenn Nukleinsäure beschriftet wird

Acridine-Ester (nsp-dmae-nhs), gelbes Pulver, CAS-Nr.: 194357-64-7, ist ein wichtiges Chemilumineszenz-Reagenz.die Kennzeichnung vonAcridinestersind mild, die Kennzeichnung ist hoch und die Kennzeichnung wirkt sich nicht auf die Trennung aus.

Darüber hinaus ist der Chemilumineszenzprozess von Akridinester bei geringem Hintergrund schneller und kann Licht in Gegenwart von Natriumhydroxid und Wasserstoffperoxid emittieren.Acridine-Ester-Chemilumineszenz-Reagenzien haben eine gute Stabilität und sind leicht zu lagern.

Zusätzlich zur Anwendung in der Immunoassay kann der Acridineester auch zur Kennzeichnung von Oligonukleotidfragmentproben zur Gen- oder Mikrobialdetektion verwendet werden.Acridine-Esterverbindungen eignen sich zur Kennzeichnung von DNA-Strängen zur Herstellung von Chemilumineszenz-DNA-Sonden.

Moderne medizinische Forschungsergebnisse zeigen, dass viele Krankheiten wie Krebs und genetische Krankheiten mit DNA-Mutationen zusammenhängen, und viele Infektionskrankheiten werden durch Viren verursacht,Bakterien oder Parasiten in der UmweltDie Analyse der spezifischen Sequenz der Virus-DNA ist förderlich für die Kontrolle der Epidemie-Situation.Der Nachweis von DNA-Sequenz und Basenmutation in seinem Strang ist bei der Genuntersuchung von großer Bedeutung, Früherkennung und Behandlung von genetischen Erkrankungen und Erkennung pathogener Gene.

Bei der Analyse der Nukleinsäurehybridisierung ist die Vorbereitung einer spezifischen und sensiblen, gekennzeichneten Sonde der Schlüssel zum Erfolg der Nukleinsäurehybridisierungsanalyse.Akridineester-Derivate können ohne Katalysator direkt auf der Nukleinsäure-Sonde markiert werden und die Lumineszenz-Quantenleistung wird nicht beeinflusstDarüber hinaus wird unter bestimmten Bedingungen der auf der nichthybriden Einstrang-DNA markierte Akridinester hydrolysiert und zerstört.und nur der durch die Hybridisierung gebildete Doppelstrang ist geschützt Nur der Akridineester kann Chemilumineszenz erzeugen, und der gesamte Hybridisierungsprozess kann ohne Trennung überwacht werden.

Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Kennzeichnung von Nukleinsäuren mit Acridineester, das folgende Schritte umfasst:

(1) Die 5' und 3' Enden der DNA-Sonde wurden geschützt.

(2) Etikettierung von Akridin-Estern: 25 mm NHS-Akridin-Estern wurden in DMSO gelöst und 1 m HEPES-Puffer (pH = 8,0) hergestellt. Gemäß dem Molarverhältnis der Nukleinsäureprobe: NHS-Akridin-Estern = 1:5, wurde in den HEPES-Puffer gegeben und 1 Stunde lang bei 37 °C reagiert;

(3) Durch HPLC gereinigt. Im Schritt (1) umfaßt der Schutz der 5' und 3' Enden der DNA-Sonde insbesondere:Verwendung von s-Ethyl-Trifluorothioacetat zum Schutz von 3' End-nh 2.

Desheng Technologie hat Forschung und EntwicklungChemilumineszenzreaktorenNach erfolgreicher Entwicklung wurde es auf den Markt gebracht und gewann die allgemeine Anerkennung der Kunden. Es gibt sechs verschiedene Gruppen von Acridine-Estern.Es gibt Luminol und Isoluminol.Die Akridine-Esterreihe weist eine hohe Lichtwirksamkeit auf und gehört zur direkten Lumineszenz.