Acridinester kann DNA-Schaden ermitteln, der durch Formaldehyd und Acetaldehyd verursacht wird!

Verschiedene exogene und endogene Faktoren wie Umweltverschmutzungen, ionisierende Strahlung, medikamentöse Chemotherapie und Zellstoffwechsel können verschiedene Formen von DNA-Schäden verursachen.DNA-Doppelstrangbrüche haben die größte Schädigung der Stabilität des Genoms und können das Überleben von Zellen gefährdenDie Entwicklung einer einfachen, schnellen und sensiblen Methode zur Erkennung von DNA-Hybridisierung und Genotoxizitätswirkungen ist ein sehr bedeutungsvolles Forschungsthema.Hier ist eine kurze Einführung in die Methode zur Erkennung von DNA-Schäden.

Welche Arten von DNA-Schäden werden nachgewiesen

Zu den Methoden zur Erkennung von DNA-Schäden gehören Gel-Elektrophorese, ultraviolette Spektrophotometrie, Fluoreszenz und Elektrochemie sowie Chemilumineszenzanalyse.Die Chemilumineszenzanalyse (CL) ist aufgrund ihrer hohen Empfindlichkeit in den Bereichen Umwelt und Biowissenschaften weit verbreitetDas Formaldehyd und das Acetaldehyd sind beide Umweltverschmutzer. Bis zu einem gewissen Grad kann es zu DNA-Schäden führen.Untersuchen Sie die Menge der in die DNA eingebetteten Acridiniumester vor und nach der Schädigung durch Formaldehyd und Acetaldehyd, die Veränderungen der Chemilumineszenzintensivität von Acridinium-Estern verursachen, und das Schadensverhalten von Formaldehyd und Acetaldehyd auf der DNA untersuchen.Ein einfaches Chemilumineszenzanalyseverfahren zur Bewertung des Grades der durch Formaldehyd und Acetaldehyd verursachten DNA-Schäden.

Akridineestermethode zur Nachweis von Umweltschäden an der DNA

1Zuerst wird die verwendete Glaslumineszenzzzelle mehrere Stunden lang in eine bestimmte Menge konzentrierter Stickstoffsäure eingetaucht, versäuert und dann mit Wasser gespült.20 μL von 1 mg/mL Thymus-DNA des Kalbs in die sauerte Lumineszenzzzelle hinzugefügt, und platzieren Sie es für 1 Stunde, um die DNA auf dem Boden des lichtemittierenden Pools adsorbiert wird,und dann wird die nicht adsorbierte Thymus-DNA mit Sekundärwasser gewaschen, um den lichtemittierenden Pool mit adsorbierter DNA zu erhalten..

2. 50 μl von 9,6 × 10-7 g/ml hinzufügenAcridiniumesterDie Chemerierungsreaktion dauert eine Stunde, bis die AE in die DNA-Doppelstrangstruktur eingebettet ist und die unchimerische AE mit Sekundärwasser abgewaschen wird.in der lumineszierenden Zelle Luminessenz-Initierungsreagenzien in der Reihenfolge hinzufügen, um die Chemilumineszenz zu erkennen, die durch AE erzeugt wird, die in der DNA chimeriert istBei Feststellung einer Schädigung der DNA des Kalbsthirns durch Formaldehyd und Acetaldehyd wird dem DNA nach der AE-Chimerisation ein Schadensreagenz zugesetzt und nach einer bestimmten Zeit verwendet.Das zweite Wasser spült die nach der DNA-Schädigung freigesetzten AE weg., und das Reagenzium zur Lumineszenzinitiation wird hinzugefügt, um die Chemilumineszenzintensität der AE-Chimäre in der DNA zu ermitteln.

Studien haben gezeigt, dass Acridiniumester als Chemilumineszenzindikator mit einer guten Struktur der interkalierenden DNA-Doppelhelix verwendet werden kann.Diese Nachweismethode ist für DNA-Brechenschäden und Chemilumineszenz-Erkennung möglich.. Es hat die Vorteile von Einfachheit und Empfindlichkeit. Schadensstudien bieten eine einfache Forschungsmethode.thermische Stabilität und ein hohes Signal-Rausch-Verhältnis, und die Etikettierungsbedingungen sind mild, die Etikettierungsrate ist hoch und die Trennung beeinflusst die Trennung nach der Etikettierung nicht. , so wird es als idealer chemischer Marker angesehen.