Acridinester kann DNA-Schaden ermitteln, der durch Formaldehyd und Acetaldehyd verursacht wird!

Verschiedene exogene und endogene Faktoren, wie Klimaschadstoffe, ionisierende Strahlung, Drogenchemotherapie und Zellstoffwechsel, können verschiedene Formen von DNA-Schaden verursachen. Unter ihnen haben DNA-doppelstrangbrüche den meisten schweren Schaden zur Genomstabilität und können das Überleben von Zellen bedrohen. Ein einfaches herstellend, ist schnelle und empfindliche Methode für die Entdeckung von DNA-Hybridations- und -Genotoxizitätseffekten ein sehr bedeutungsvoller Forschungsgegenstand. Ist hier eine kurze Einleitung zur Methode der DNA-Schadenentdeckung.

Was die Arten der DNA-Schadenentdeckung sind

DNA-Schadennachweismethoden umfassen Gelelektrophorese-, ultraviolettespektralphotometrie, Fluoreszenz und Elektrochemie und Chemolumineszenzanalyse. Chemolumineszenzanalyse (CL) ist auf den Gebieten der Umwelt und der Biowissenschaften wegen seiner hohen Empfindlichkeit, breiter linearer Strecke, bequemer Bedienung, schneller Analyse und einfacher Automatisierung weitverbreitet gewesen. Formaldehyd und Acetaldehyd sind beide Klimaschadstoffe. Bis zu einem gewissen Grad kann sie DNA-Schaden verursachen. Studieren Sie die Menge von acridinium Estern, die in DNA vor und nach dem Schaden des Formaldehyds und des Acetaldehyds eingebettet werden und Änderungen in der Chemolumineszenzintensität von acridinium Estern verursachen, und studieren Sie das Schadenverhalten des Formaldehyds und des Acetaldehyds auf DNA. Stellen Sie eine einfache Chemolumineszenzberechnungsmethode her, um den Grad an DNA-Schaden auszuwerten verursacht durch Formaldehyd und Acetaldehyd.

Acridinestermethode für die Entdeckung von Umweltschädigung zu DNA

1. Zuerst tränken Sie die Glaslumineszenzzelle, die in einem bestimmten Betrag konzentrierter Salpetersäure einige Stunden lang benutzt wird, säuern Sie und spülen Sie dann mit Wasser aus. Fügen Sie μL 20 von DNA Thymusdrüse des Kalbs 1mg/mL der gesäuerten Lumineszenzzelle, hinzu und setzen Sie es 1 Stunde lang, um die DNA zu machen wird adsorbiert auf der Unterseite des lichtemittierenden Pools, und dann adsorbierte das unadsorbed Kalb Thymusdrüse, die DNA mit Sekundärwasser gewaschen wird, um das lichtemittierende Pool mit DNA zu erreichen.

2. Fügen Sie 50μL von acridinium 9.6×10-7g/mL Ester der Lumineszenzzelle hinzu, und die chimerization Reaktion ist, damit 1h die AE in der doppelsträngigen Struktur DNA einbettet und wäscht weg die unchimeric AE mit Sekundärwasser. Schließlich in der Lumineszenzzelle fügen Sie Lumineszenzanfangsreagenzien in der Folge hinzu, um die Chemolumineszenz zu ermitteln, die von AE erzeugt wird, chimerized in DNA. Wenn Sie den Schaden von Kalbthymusdrüse DNA durch Formaldehyd und Acetaldehyd ermitteln, fügen Sie Schadenreagens der DNA nach AE-chimerization, hinzu und benutzen Sie es nach einer bestimmten Frist. Das zweite Wasser wäscht weg die befreite AE, nachdem die DNA beschädigt ist, und das Lumineszenzanfangsreagens wird addiert, um die Chemolumineszenzintensität der AE zu ermitteln, die in der DNA chimeric ist.

Studien haben gezeigt, dass acridinium Ester als Chemolumineszenzindikator mit einer guten Struktur des Einschiebens von DNA-Doppelhelix benutzt werden kann. Diese Nachweismethode ist für DNA-Bruchschaden und Chemolumineszenznachweismethode durchführbar. Sie hat die Vorteile von Einfachheit und von Empfindlichkeit. Schadenstudien liefern eine einfache Forschungsmethode. Desheng-Acridin-Ester-Lumineszenzmarkierungen haben die Eigenschaften der guten hydrolytischen Stabilität, der Wärmebeständigkeit und des hohen störsignalisierenden Verhältnisses, und die Kennzeichnungsbedingungen sind mild, ist die Kennzeichnungsrate hoch, nach der Kennzeichnung und die Trennung beeinflußt die Trennung nicht. , So wird es eine als ideale chemische Markierung betrachtet.