CAS 77-86-1 Tris Salzsäure-Puffer für Elektrophorese des Protein-SDS-PAGE

Tris Salzsäurepuffer für Elektrophorese des Proteins SDS-PAGE; CAS 77-86-1; Pufferlösung; Weißes Kristallpulver

Tris Salzsäurepuffer für Elektrophorese des Proteins SDS-PAGE

Tris-Hydrochlorid ist Tris-hydroxymethylaminehydrochlorid Tris-HCl-Puffer, der für das meiste Protein und Säure-bedingten die Forschungsnukleinexperimente passend ist. Es wird normalerweise als Puffer für Elektrophoreseexperimente des Proteins SDS-PAGE mit guter Elektrophorese verwendet. Hochauflösend.
Biologischer Puffer bestanden aus Tris, häufig vorbereitet mit pH-Werten von 6,8, 7,4, 8,0, 8,8. Seine pHänderungen verhältnismäßig groß mit Temperatur. Im allgemeinen verringert sich das pH um 0,03 für jeden Grad Temperaturanstieg. 1M Tris-HCl 6,8 und 1.5M Tris-HCl 8,8 sind die allgemein verwendetsten Reagenzien für SDS-PAGE. Tris kann Nukleinsäuren und Proteine auflösen.

Konfiguration der Tris-Pufferlösung

Tris Rohstoff des Salzsäurepuffers
SDS-PAGE ist eine ziemlich allgemeine Polyacrylamidgelelektrophorese. Es benutzt Polyacrylamidgel als Unterstützungsmedium und ist für die Trennung von Proteinen und von Oligonucleotides passend. Polyacrylamidgele haben eine mikroskopische Netzstruktur und einen Molekularsiebeffekt zu haben. Sie werden in zwei Formen unterteilt: nicht-Denaturierung von Polyacrylamidgelelektrophorese (Gebürtig-SEITE) und von SDS-Polyacrylamidgel (SDS-PAGE).
Im unterbrochenen Elektrophoreseexperiment des Proteins SDS-PAGE benutzte der Gelvorbereitungspuffer das System des Puffers Tris-HCL, hatte das starke Gel einen pH von 6,7, und das Trennungsgel hatte einen pH von 8,9; und der Elektrophoresepuffer benutzte das Tris-Glycinpuffersystem. Im starken Elektrophoresegel ist sein pH schwach, so nur eine kleine Menge Glycin sich trennt säurehaltig. Unter der Aktion eines elektrischen Feldes, ist seine Migrations-Leistungsfähigkeit niedrig; während das Chlorverbindungsion sehr hoch ist und bildet eine Leitung zwischen den zwei in der niedrigeren Sexzone, die Proteinmolekülbewegungen zwischen den zwei. Da die Leitfähigkeit umgekehrt zur elektrischen Feldstärke proportional ist, bildet diese Zone eine höhere Spannungssteigung, zusammen drückt die Proteinmoleküle und kondensiert in eine schmale Zone.

Wenn die Probe das Trennungsgel kommt, wegen der Zunahme von pH des Gels, wird sie alkalisch. Das Glycin trennt sich in einer großen Menge und in den Migrationsratenzunahmen. Es folgt direkt dem Chlorverbindungsion. Gleichzeitig wegen der Schrumpfung der Trennungsgel-Porengröße, werden die Protein Moleküle entsprechend ihrem inhärenten chargeability und molekularen Größe getrennt.
Deshalb ist der Einfluss von pH auf das gesamte Reaktionssystem sehr wichtig. Wenn das Problem nicht gut gelöst werden kann, nachdem man andere Faktoren im Experiment ausgeschlossen hat, sollte dieser Faktor zuerst betrachtet werden. Selbstverständlich können andere Faktoren von vielen Aspekten auch betrachtet werden.
Salzsäure Tris wird durch mischendes Tris gemacht und Salzsäure, wie tromethamine, tromethamine, 2 amino-2- (Hydroxymethyl-) - 1,3-propanediol, etc., alle beziehen sich auf Tris, das durch wichtige Rohstoffe Desheng produziert wird, kann für andere verschiedene Puffersysteme auch verwendet werden.