Cyclohexylamin 1135-40-6 CASs CAPS Propanesulfonic sauer im Experiment

Cyclohexylamin propanesulfonic saures CAPS ist ein allgemein verwendeter biochemischer Rohstoff. Es kann als Härtemittel für Flüsse, Trockenmittel und wasserbasierte Isozyanats in den Beschichtungen verwendet werden. In der biochemischen Industrie wird es normalerweise als biologischer Puffer verwendet. Entsprechend seiner Reinheit und Störstellengehalt ist die Anwendungsindustrie auch unterschiedlich.

Nach Ansicht der Molekülstruktur ist CAPS eine Cyclohexann-ersatzsulfaminsäure mit einem Molekulargewicht von 221,32 und ein amphoter. Es ist ein sehr guter biologischer Puffer mit einer pH-Pufferstrecke 9.7-11.1. Es wird normalerweise für WB-Experimente verwendet. Puffer für Membran oder -nitrozellulose des Proteins PVDF Übergangsnc-Übergangsmembran.

WB steht für immunoblotting Experiment des Westfleckproteins. Das Prinzip ist, die Zellen oder biologische Proben behandelt mit Gelelektrophorese mit spezifischen Antikörpern zu färben und erhält den Ausdruck von spezifischen Proteinen in den analysierten Zellen oder von Geweben, indem es die Position und die Tiefe des Farbtons analysiert. Informationen. Die experimentellen Anmerkungen sind, wie folgt:

CAPS-Reagens

1. SDS-PAGE Elektrophorese: ähnlich der Nukleinsäurehybridationsmethode, außer dass ermittelt ist das Protein, ist die Sonde der Antikörper, und dem farbigen Sekundärantikörper wird beschriftet. Im allgemeinen wird Drei-Glyzerin- oder Tris-Tricinepuffersystem für Proteine mit niedrigem Molekulargewicht benutzt, und CAPS-Puffersystem ist für Proteine des hohen Molekulargewichts besser. Glycin im Puffer beeinflußt das Der Reihe nach ordnen, also ist der Übergangspuffer, der für das Der Reihe nach ordnen benutzt wird, 10mM/1CAPS10% Methanol. Die Konzentration des Methanols im electroimprinting Puffer CAPSs ist 0-20%. Im Allgemeinen hat ein Puffer mit einer hohen Methanolkonzentration einen guten Übergangseffekt auf Proteine mit niedrigem Molekulargewicht, während ein Puffer mit einer niedrigen Methanolkonzentration oder sogar keinem Methanol für Proteine des hohen Molekulargewichts gut ist. Übertragung.

2. Wenn PVDF-Membran verarbeitet wird, tränken Sie sie im Methanol für einige Sekunden, und setzen Sie sie dann in electroimprinting Puffer CAPSs ein. Operationen der weiteren Verfolgung müssen verhindern, dass die Membran austrocknet. Wenn die PVDF-Membran trocken wird, wiederholen Sie die vorhergehenden Schritte. Das Elektrophoresegel muss auch in CAPS-Puffer für 5-10 Minuten getränkt werden. Etwas stark basische Proteine benötigen nicht diesen Schritt.

3. Die Übergangszustände sind- normalerweise konstante Spannung 50V, gegenwärtige Intensität 100-170mA und electroimprint Übertragung bei Zimmertemperatur. Die Blasen zwischen dem Gel und PVDF-Membran müssen entfernt werden. Für Proteine mit höherem Molekulargewicht, zahlen Sie Aufmerksamkeit, um die Übertragungszeit auszudehnen.

4. Bevor sie färbt muss PVDF-Membran herausgenommen werden und mit entionisiertem Wasser ausgespült werden, getränkt worden im Methanol, dann färbte mit 0,1% Coomassie-Brillantblau für 30-50 Sekunden, entfärbt mit 50% Methanol, gewaschen mit entionisiertem Wasser und getrocknet.

Das oben genannte stellt einige Angelegenheiten vor, die Aufmerksamkeit im Protein benötigen, das Experiment aufprägt. Zusätzlich zum Experiment selbst, erinnert Desheng-Technologie Sie, dass zur Sicherheit und zur Gesundheit, bitte Laborkleidung tragen Sie und Wegwerfhandschuhe für Operation tragen Sie. Der Galvano-Prägungspuffer CAPSs wird empfohlen, durch Desheng produziert zu werden die Konfiguration der propanesulfonic Säure des hochwertigen Cyclohexylamins.