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Wie man guten s-Puffer, HEPES und Rohre wählt?

2021-03-25
Wie man guten s-Puffer, HEPES und Rohre wählt?

Wenn wir den guten s-Puffer benutzen, verwirren wir immer unbeabsichtigt das HEPES und die Rohre im guten s-Puffer und denken, dass sie die selben sind, die es unmöglich, sie sehr genau zu unterscheiden macht. Tatsächlich gibt es Ähnlichkeiten zwischen ihnen, aber es gibt auch viele verschiedenen Eigenschaften.

 

Besonders bei unserem Experiment, ein kleiner Unterschied möglicherweise führt zu den Ausfall des Experimentes. So müssen wir kennen, welcher Puffer ist und was er tut? Um zwischen HEPES und Rohren im Puffer zu unterscheiden, ist was der Unterschied zwischen ihnen? Unter Verwendung was sollten wir beachten wann?

 

Pufferlösung ist eine Art spezielles Puffersystem für Biowissenschaftsforschung. In den biochemischen Experimenten spielt Pufferlösung eine unentbehrliche Rolle. Sie kann dem Einfluss einer kleinen Menge starker Säuren und Basis widerstehen und hält das pH instand, das zur physiologischen Umwelt für das System am nähsten ist. HEPES und Rohrpuffer sind in den biologischen Experimenten allgemein verwendet.

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Paketbild biologischen Puffers Desheng

Die pH-Pufferstrecke HEPES ist 6.8-8.2, das eine Art zwitterionic biologischer Puffer ist. Sie ist im Wasser löslich und bildet nicht stabile Komplexe mit Metallionen. In den meisten Fällen behindert sie nicht biochemische Prozesse. Sie kann in einer Vielzahl von biochemischen Reaktionen und als Pufferreagens in einigen Zellkulturmedien verwendet weitverbreitet sein.

 

HEPES ist in den Zellkulturmedien von verschiedenen Arten von Organismen allgemein verwendet; in der Proteinforschung ist es als die Komponente und das Eluent des bindenen Puffers in der Kationenaustauschchromatographie häufig benutzt; in DNA-Forschung wird es als der Puffer des Kalziumphosphat- und DNA-Sedimentbildungssystem, AFM und Electroporationsexperiment verwendet.

 

Darüber hinaus behindert HEPES die Reaktion zwischen DNA und Restriktionsenzym und ist nicht für Lowrys Methode passend. HEPES-Puffer ist in der Forschung von Organellen und von empfindlichen Proteinen und von Enzymen pH sowie in den biochemischen Diagnoseausrüstungs-, DNA-/RNS-Extraktionsausrüstungen und IN PCR-Diagnoseausrüstungen häufig benutzt. Es ist ein Wasserstoffionpuffer, der die konstante pH-Strecke für eine lange Zeit steuern kann. Wenn die abschließende Konzentration 10-50 mmol/l ist und das Kulturmedium 20 mmol/l HEPES enthält, kann die Pufferkapazität erzielt werden.

 

Die pH-Pufferstrecke der Rohre ist 6.1-7.5, im Wasser und im Löslichen in NaOH-Lösung unlösliches. Unterschiedlich zu Puffern kann das Enthalten von Aminogruppen BIS (2-hydroxyethyl) (wie BIS Tris, bicine), Rohre stabile Komplexe mit den meisten Metallionen nicht bilden, also ist- es für die Puffer passend, die Metallionen enthalten.

 

Entsprechend vorhergehenden Studien können ROHRE, um tubulin zu reinigen, indem man Zellulosephosphatchromatographie benutzt werden, und verwendet, recombinant GTP-Bindeprotein ARF1 und ARF2 durch Gelfiltration als Puffer zu reinigen, um ketoenzyme von Escherichia Coli zu kristallisieren. Darüber hinaus wegen der Bildung von freien Radikalen, Rohr ist nicht für Redox- System passend. In der Kationenaustauschchromatographie sollte niedrige Konzentration des Rohrpuffers wegen seiner verhältnismäßig hohen Ionenstärke und konzentrationsabhängigen pKa Wertes verwendet werden.

 

Es kann gesehen werden, dass weder Rohre noch HEPES stabile Komplexe mit Metallionen bilden können, das für die Lösung passend ist-, die Metallionen enthält. Jedoch gibt es einige Unterschiede zwischen ihnen. Im Hinblick auf Löslichkeit ist Rohr im Wasser unlöslich, während HEPES gute Wasserlöslichkeit hat. Im Hinblick auf Pufferstrecke ist Rohr zur neutralen Person säurehaltig, und HEPES ist zu alkalischem neutral. Dieses liegt an den strukturellen Unterschieden zwischen ihnen hauptsächlich. Rohr hat zwei Sulfogruppen, und HEPES enthält eine Sulfogruppe und Hydroxylgruppe.

 

Darüber hinaus haben Rohre und HEPES etwas Beschränkungen in der Anwendung einiger Systeme. Deshalb wenn wir die oben genannten Puffer wählen, müssen wir die Eignung des Versuchssystems und den Unterschied ihrer Eigenschaften betrachten.

 

Wir sollten lernen, die Ähnlichkeiten und die Unterschiede bezüglich dieser Reagenzien zu unterscheiden und zu verstehen, um das R u. das D und die Produktion unserer verschiedenen Produkte besser zu fördern. Desheng befolgt durchweg diese Art des subtilen Unterschiedes, um bessere Produkte ununterbrochen zu entwickeln und zu produzieren.