Puffer ist eine Art Substanz, die den pH des Reaktionssystems beibehält, normalerweise bestanden aus schwachen Säuren, schwache Basis und ihre Salz- oder amphoterensubstanzen, wie CO2 in der Fotosynthese, im Bikarbonat im menschlichen Plasma, in etc. sind Substanzen mit Dämpfungsfähigkeit, die für zelluläre metabolische Reaktionen notwendig ist. Auf dem Gebiet der biochemischen Entdeckung, sind die allgemein verwendetsten Tris-Puffer und Phosphatpuffer, und es gibt bestimmte Unterschiede zwischen den zwei.
1. Pufferstrecke
Die Pufferbetriebsstrecke Tris-Puffers ist 5.0~9.2, dort sind Unterschiede entsprechend verschiedenen Säuren von Tris.
Allgemein verwendeter pH in den biochemischen Tests sind 6,8, 7,4, 8,0, 8,8. Tris-Puffer werden mehr und mehr in der biochemischen Forschung benutzt, und es gibt eine Tendenz, Phosphatpuffer zu übersteigen. Zum Beispiel sind Tris-Puffer in der SDS-Polyacrylamidgelelektrophorese benutzt worden, und Phosphate werden selten benutzt.
Die Pufferstrecke Puffers des Phosphat PBS ist 1~12, justiert entsprechend dem Verhältnis von verschiedenen Phosphatsäuresalzen.
Phosphat ist einer der traditionellsten und umfangreichsten Puffer in der Biochemie. Phosphorsäure hat zwei saure Salze. Sie sind zweitrangige Auflösung und haben zwei Dissoziationskonstanten. Deshalb ist die pH-Strecke der Puffer, die sie machen, sehr breit. Im Allgemeinen ist Kalisalz besser als Natriumsalz, und seine Löslichkeit ist hoch. SDS-Polyacrylamidgel-Elektrophoresepuffer kann Kalisalz, Kalisalz nicht benutzen von SDS herbeiführt.
2. Verwendungsgebiete
Tris ist ein tromethamine als Aminopufferbasis, die nicht Natrium enthält. Es holt Natrium- und Kaliumionen nicht in das System und beeinflußt nicht den osmotischen Druck. Es kann mit salzigem auch hinzugefügt werden, um die Salzbalance gegebenenfalls zu justieren. Es hat geringe Wirkung auf den biochemischen Prozess, und es bildet nicht Niederschläg mit Kalzium, Enzymen und Schwermetallionen und beeinflußt nicht die Tätigkeiten von Kinasen, von Phosphatasen, von Dehydrogenasen und von anderen Enzymen. Normalerweise verwendet für DNA, RNS und Protein bezogene Experimente, sind allgemein verwendete Puffersysteme: Puffer Tris-HCl, TBS-Puffer, TE-Puffer, TAE-Puffer, TBE-Puffer, Tris-Glycinpuffer, Tris-Phosphatpuffer, etc. Es sollte gemerkt werden, dass das pH von Tris groß durch Temperatur beeinflußt wird und es notwendig ist, die Temperatur zu steuern; die Tris-Lösung ist alkalisch, absorbiert sie CO2 und beachtet das Versiegeln.
Obgleich Phosphatpuffer eine breitere Pufferbetriebsstrecke haben, ist die Dämpfungsfähigkeit über pH 7,5 kleiner. Tris selbst ist besser, wenn sie alkalisch ist. Phosphatieren Sie sich kann Kationen trennen und hat einen Salzbalanceneffekt, der nicht den Organismus bricht. Proteinstruktur und biologische Eigenschaften, Puffer des Phosphat PBS wird normalerweise für Zellexperimente verwendet. Jedoch hemmt Niederschlag mit Kalzium, Magnesiumionen und Schwermetallionen auch die Tätigkeit von bestimmten Enzymen.
Heutzutage ist die Anwendung von Tris-Puffer mehr und mehr, gibt es eine Tendenz, Phosphatpuffer, Desheng-Technologie zu übersteigen sich konzentriert auch auf die Entwicklung von bezogenen Anwendungen Tris Puffer. Jedoch wird es empfohlen, dass Sie den besten biologischen Puffer entsprechend den Reagensanforderungen des Experimentes vorwählen.
